Question

【題目】基因工程技術已成為生物科學的核心技術，限制酶被譽為基因工程中的“分子手術刀”．圖中的Sma I、EcoR I、BamH I、Hind III都是限制酶，圖中的箭頭表示幾種限制酶的酶切位點．回答下列問題：
（1）基因工程的核心是構建 ． 用圖中的質粒和外源DNA構建重組質粒時，不能使用Sma I切割，原因是 ． 重組質粒中抗生素抗性基因可作為標記基因，原因是 ．
（2）將日的基因導入植物細胞時，采用最多的方法是 ． 目的基因進入受體細胞后的表達過程中，啟動子需與識別和結合，從而驅動轉錄過程．最終目的基因是否成功翻譯咸蛋白質，常用的方法進行檢測，若出現雜交帶，表明目的基因已形成蛋白質產品．

Answer 1

【答案】
（1）基因表達載體；SmaI會破壞質粒中的標記基因和外源DNA中的目的基因；它能鑒別受體細胞中是否含有目的基因
（2）農桿菌轉化法；RNA聚合酶；抗原﹣抗體雜交
【解析】解：（1）基因工程的核心步驟為基因表達載體的構建．質粒抗生素抗性基因為標記基因，由圖可知，標記基因和外源DNA目的基因中均含有SmaI酶切位點，都可以被SmaI酶破環，故不能使用該酶剪切質粒和含有目的基因的DNA．重組質粒中抗生素抗性基因可作為標記基因，它能鑒別受體細胞中是否含有目的基因．（2）將日的基因導入植物細胞時，采用最多的方法是農桿菌轉化法．目的基因進入受體細胞后的表達過程中，啟動子需與RNA聚合酶識別和結合，從而驅動轉錄過程．最終目的基因是否成功翻譯咸蛋白質，常用抗原﹣抗體雜交的方法進行檢測，若出現雜交帶，表明目的基因已形成蛋白質產品． 所以答案是：（1）基因表達載體 SmaI會破壞質粒中的標記基因和外源DNA中的目的基因 它能鑒別受體細胞中是否含有目的基因（2）農桿菌轉化法 RNA聚合酶 抗原﹣抗體雜交
【考點精析】關于本題考查的基因工程的原理及技術，需要了解基因工程的原理是利用DNA重組技術才能得出正確答案．