Question

【題目】淀粉酶在生產生活中有廣泛應用。下面是透明圈法篩選高產淀粉酶目標菌的示意圖。回答下列問題。

（1）配制培養微生物的培養基一般都要求在含有_____等主要營養物質的基砒上，還需滿足微生物生長對_______的要求。將微生物接種到已滅菌的培養基上，應在_____附近進行操作。

（2）用加有可溶性淀粉的平板篩選淀粉酶產生菌株，發現培養基上長出甲、乙菌落，碘染后發現乙菌落周圍有透明圈（如圖所示），由此說明乙菌落中含有______，產生透明圈的原因是_______________________________。

（3）對乙菌落再用稀釋涂布平板法進一步接種培養，由于此方法用稀釋度足夠高的菌液將___________，能對目標菌進行________和計數，從而獲取目標菌。

Answer 1

【答案】水、碳源、氮源、無機鹽 pH、特殊營養物質、氧氣 酒精燈火焰 分解淀粉的目標菌 含淀粉的培養基原本不透明，但在淀粉酶的作用下，淀粉水解為單糖并為目標菌所利用，碘染后在菌落附近就出現透明圈了 聚集在一起的微生物分散為單個細胞，從而在培養基表面形成單個菌的菌落 分離、純化

【解析】

微生物的培養需要提供的基本營養物質：碳源（提供所需碳元素的營養物質）、氮源（提供所需氮元素所需的營養物質）、水、無機鹽、特殊營養物質——生長因子（維生素、氨基酸、堿基等），微生物培養所需的條件：pH、氧氣條件、特殊營養等；為了防止微生物的感染，實驗操作過程應在無菌條件下完成——在酒精燈火焰旁操作；透明圈法的基本原理：含有可溶性淀粉的培養基中培養微生物，生出菌落后，將菌落用碘液處理，若菌種能產生淀粉酶，則其附近的淀粉被水解為還原糖，因此會出現“透明圈”；統計菌落數目時，若樣品的稀釋度足夠高，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌；通過統計平板上的菌落數，就能測出樣品大約的活菌數。

（1）培養基的成分包括水、碳源、氮源、無機鹽等營養物質，以及pH、特殊營養物質、氧氣條件等。

（2）乙菌落周圍出現透明圈，說明乙菌落含有分解淀粉的目標菌，故應選擇乙菌落進一步純化從而得到目標菌。

（3）對乙菌落再用稀釋涂布平板法進一步接種培養，由于此方法用稀釋度足夠高的菌液聚集在一起的微生物分散為單個細胞，從而在培養基表面形成單個菌的菌落，能對目標菌進行分離、純化和計數、從而獲取目標菌。