Question

【題目】胡蘿卜素是一種常見的食品添加劑，美國、日本等國通過轉基因技術培有出一種黃金大米。如用將同時含有酶A、酶B、酶D這二種酶基因的表達載體導人水稱細跑.已知酶A基因來自細菌，酶B基因來自玉米，酶D基因來自其他植物，其中的酶A基因和酶B基因可使水稻胚乳富含β-胡麥卜素而呈現金黃色。請回答下列問題：

（1）酶A、B、D基因遺傳信息不同的原因是___________________________________。

（2）科學家獲取酶A、B、D基因的方法各不相同，酶A基因是通過PCR獲得，該過程中DNA解旋需加熱至_______℃；酶B基因是從cDNA文庫中獲得，cDNA文庫和基因組文庫相比，基因中_______(填“有”或“無”)啟動子，酶D基因作為標記基因，其作用是_________________________。

（3）將含有這三種酶基因的表達載休導人受體細胞可用我國科學家獨創的一種方法，該方法簡便經濟，此方法叫______________。

（4）要檢測轉基因生物的染色體DNA上星否插入了目的基因，檢測方法采用______________技術用放射性同位素標記的DNA片段作為__________________，與基因組DNA結合，若結果顯示出雜交帶，表明目的基因已插入染色體DNA中。

（5）成功導入上述基因的水稻細胞可通過植物組織培養技術獲得幼苗，在組織培養實驗中，為什么要強調相關材料，器具的滅菌以及無菌操作？___________________________________。

Answer 1

【答案】脫氧核苷酸（堿基）的（數量）排列順序不同 90～95 無 鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來 花粉管通道法 DNA分子雜交（分子雜交） 探針 雜菌消耗培養基營養物質，并產生對培養物有害的物質，導致培養物迅速死亡

【解析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）遺傳信息是指，DNA分子中特定的堿基序列。

（2）PCR技術解旋的溫度為90～95℃；cDNA是通過逆轉錄而來，無啟動子和終止子序列；標記基因的作用主要是鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。

（3）我國科學家獨創的一種導入方法是花粉管通道法。

（4）檢測目的基因常用DNA分子探針，通過DNA分子雜交技術，觀察是否出現雜交帶。

（5）植物組織培養過程一定要無菌，否則會因為雜菌污染消耗培養基的營養物質或產生有害物質，導致培養物死亡。