Question

【題目】在培育轉基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養基上生長。如圖為獲得抗蟲棉的技術流程。請據圖回答下列問題：

（1）A過程需要的酶有________和________________。

（2）要把重組質粒導入土壤農桿菌，首先必須用________處理土壤農桿菌，使土壤農桿菌轉變為________態；然后將__________________在緩沖液中混合培養完成轉化過程。

（3）含有重組質粒的土壤農桿菌侵染離體棉花葉片組織后，將離體棉花葉片組織培養成再生植株要經過C____________和E____________。如果要確保再生植株中含有抗蟲基因，可在C過程的培養基中加入___________________。

（4）目的基因能否在棉花植株體內維持和表達其遺傳特性的關鍵是_______________。

這需要通過檢測才能知道，檢測采用的方法是_____________________。

Answer 1

【答案】（1）限制酶 DNA連接酶

（2）Ca2＋ 感受 重組質粒和感受態細胞

（3）脫分化 再分化 卡那霉素

（4）目的基因是否插入受體細胞的DNA分子上 DNA分子雜交技術

【解析】

試題分析：（1）基因表達載體構建過程中，需要用同種限制酶切割目的基因和載體，使它們產生相同的黏性末端，再用DNA連接酶把這兩個DNA片段連接起來。（2）農桿菌轉化法導入目的基因時，首先必須用Ca2＋處理土壤農桿菌，使土壤農桿菌轉變為感受態；然后將重組質粒和感受態細胞在緩沖液中混合培養完成轉化過程。（3）植物組織培養過程的關鍵步驟是脫分化和再分化。因為只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養基上生長，故若要確保再生植株中含有抗蟲基因，可在C過程的培養基中加入卡那霉素。（4）目的基因能否在棉花植株體內維持和表達其遺傳特性的關鍵是目的基因是否插入受體細胞的DNA分子上，檢測采用的方法是DNA分子雜交技術。