Question

【題目】科研人員將對絨毛生長有促進作用的胰島素樣生長因子基因(IGF-1G)導入山羊成纖維細胞內，再進行體細胞克隆獲得轉基因克隆絨山羊，其操作流程如下圖所示。請回答下列問題：

(1)過程甲在構建基因表達載體時，必須使用的工具酶是___________。基因表達載體上有RNA聚合酶的識別和結合位點，可驅動IGF-1G轉錄，該部位被稱為___________。

(2)過程乙在核移植構建重組細胞時，需要先除去___________的核，目的是____________________________________________。

(3)培養重組細胞的過程中，向培養液中通入一定濃度CO2的目的是___________________。

(4)過程丁通常將發育至___________期的早期胚胎移入代孕母羊的子宮內發育。利用胚胎分割和胚胎移植技術可獲得多個轉基因個體，這體現了早期胚胎細胞的___________。

Answer 1

【答案】限制酶和DNA連接酶 啟動子 卵母細胞 保證核遺傳物質來自含IGF-IG（或目的基因、轉胰島素樣生長因子基因）的成纖維細胞 維持培養液pH的穩定（或維持培養液的pH） 桑椹胚或囊胚 全能性

【解析】

本題以“培育轉基因克隆絨山羊”的操作流程圖為情境，考查學生對基因工程的基本操作程序、核移植技術、動物細胞培養、胚胎移植等相關知識的識記和理解能力。

(1) 在構建基因表達載體時，需使用限制酶切割含有目的基因（IGF-1G）的DNA片段和載體，再用DNA連接酶將切割后所獲得的目的基因和載體連接起來形成重組DNA分子，即必須使用的工具酶是限制酶和DNA連接酶�；�因表達載體上的啟動子位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合位點，可驅動IGF-1G轉錄出mRNA。

(2) 為了保證核遺傳物質來自含IGF-IG的成纖維細胞，在核移植構建重組細胞時，需要先除去卵母細胞的細胞核。

(3) 培養重組細胞需借助動物細胞培養技術，在此過程中，向培養液中通入一定濃度CO2的目的是維持培養液的pH。

(4) 過程丁表示胚胎移植。在進行胚胎移植時，通常選擇發育至桑椹胚或囊胚期的早期胚胎。利用胚胎分割和胚胎移植技術可獲得多個轉基因個體，這說明早期胚胎細胞具有全能性。