Question

【題目】農(nóng)作物秸稈是重要的生物資源，下圖是研究人員篩選纖維素分解菌的部分實驗過程，請回答相關(guān)問題：

（1）應(yīng)用______溶解土壤.培養(yǎng)基A的成分為纖維素粉、Na2HPO4·7H2O、K2HPO4、MgSO4·7H2O、KCl、酵母膏、水解酪素和水。培養(yǎng)基B是培養(yǎng)基A中加入某種成分制得，該成分為______.用培養(yǎng)基A進行培養(yǎng)的目的是__________________________。

培養(yǎng)基B________（選填“有”或“無”）選擇作用，請設(shè)計一個對照實驗來驗證你的判斷：__________________________________________________________________________________________。

（2）取培養(yǎng)基B中的菌落1按照嚴格無菌操作接種于培養(yǎng)基C，在適宜條件下培養(yǎng)后出現(xiàn)兩種單菌落a和b，最可能的原因是_____________________。

（3）對菌落a中纖維素分解菌所產(chǎn)纖維素酶的活力進行了探究，結(jié)果如下。

一個酶活力單位是指______________________。若用菌落a中的纖維素分解菌分解秸稈，則pH和溫度應(yīng)分別是____________________。

Answer 1

【答案】無菌水 瓊脂 增加纖維素分解菌的濃度 有 將培養(yǎng)基A培養(yǎng)的菌液接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，比較該培養(yǎng)基上與培養(yǎng)基B上的菌落數(shù) 菌落1是由兩個纖維素分解能力不同的菌繁殖而成 最適反應(yīng)條件下，1min轉(zhuǎn)化1mmol底物所用的酶量 6 20℃

【解析】

纖維素分解菌可以產(chǎn)生纖維素酶，纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶；金屬接種工具常用灼燒滅菌；剛果紅染液與纖維素呈紅色，纖維素分解菌在含有剛果紅染液的培養(yǎng)基中形成的菌落會出現(xiàn)透明圈，可以用來鑒別纖維素分解菌。

（1）溶解土壤樣品時，應(yīng)用無菌水。培養(yǎng)基A為液體選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的濃度；培養(yǎng)基B的目的是分離菌種，應(yīng)用固體培養(yǎng)基，需要在液體培養(yǎng)基A中加入瓊脂。由于培養(yǎng)基B中有大量的纖維素粉，在該培養(yǎng)基上長出的菌多數(shù)是能分解纖維素的，因此具有一定的選擇作用，因此可用完全培養(yǎng)基即牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基來檢驗其是否有選擇作用，理論上若培養(yǎng)基B有選擇作用則在完全培養(yǎng)基上長出的菌落數(shù)和種類會較多。

（2）理論上菌落是由一個活菌繁殖形成的，但實際情況有可能有的菌落是由2個或多個活菌一起繁殖而成，若是這種情況，則對菌落中的菌作進一步分離，可看到不同菌形成的菌落。根據(jù)題意分析，取培養(yǎng)基B中的菌落1按照嚴格無菌操作接種于培養(yǎng)基C，在適宜條件下培養(yǎng)后出現(xiàn)兩種單菌落a和b，說明菌落1是由兩個纖維素分解能力不同的菌繁殖而成。

（3）一個酶活力單位是指在溫度和pH等最適的條件下，1min轉(zhuǎn)化1mmol底物所用的酶量。從圖中可看出纖維素酶活力最大時對應(yīng)的pH為6，溫度為20℃。