Question

【題目】酸奶是以牛奶為原料，經過巴氏殺菌后再向牛奶中添加有益菌，經發酵制成的。家庭自制酸奶的安全隱患是有害雜菌的污染問題。為檢測自制酸奶是否被雜菌污染，進行如圖所示操作。請回答下列問題：

（1）操作中使用的三角瓶和培養基常用的滅菌方法分別是___________、____________。

（2）制備牛肉膏蛋白胨培養基時，操作順序為計算、稱量、________、_______和倒平板。

（3）取最終的牛奶稀釋液0．1mL滴在培養基上進行涂布，涂布前要將涂布器__________才能涂布。

（4）在恒溫培養箱中培養一段時間后，3個平板上菌落數分別為65個、63個、64個，則可以推測酸奶中每毫升含菌數為_________個。運用這種方法統計的結果往往較實際值偏小，原因是___________________________。

（5）在使用劃線接種法純化乳酸菌的操作中，常使用的接種工具是__________。若培養后獲得的某個平板，第一劃線區域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落，造成這種現象的操作失誤是_____________________________________。

Answer 1

【答案】干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 溶化 滅菌 灼燒冷卻后 6．4×108 有的菌落可能是由2個或多個菌體形成的 接種環 接種環灼燒后未冷卻

【解析】

1.配制牛肉膏蛋白胨固體培養基的注意事項①倒平板的溫 度一般50℃左右適宜，溫度過高會燙手，過低培養基又會凝固；②平板需倒置，這樣既可使培養基表面的水分更好地揮發，又可防止皿蓋上的水珠落入培養基，造成污染。
2.平板劃線操作的注意事項①第一次劃線及每次劃線之前都需要灼燒接種環滅菌；②灼燒接種環之后，要冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種；③劃線時最后一區域不要與第一區域相連；④劃線用力大小要適當，防止用力過大將培養基劃破。

（1）對三角瓶的滅菌方法是干熱滅菌，對培養基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。
（2）制備牛肉膏蛋白胨培養基時，操作順序為計算、稱量、溶化、滅菌和倒平板。
（3）稀釋涂布平板法中，為了防止雜菌的污染，涂布前要將涂布器灼燒冷卻后才能涂布。（4）分析圖解可知，酸奶稀釋了106倍，在恒溫培養箱中培養一段時間后，3個平板上菌落數分別為65個、63個、64個，則可以推測酸奶中每毫升含菌數為=（65+63+64）÷3÷0.1×106=6.4×108個。由于有的菌落可能是由2個或多個菌體形成的，因此運用這種方法統計的結果往往較實際值偏小。
（5）已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，進一步分離純化乳酸菌的方法是挑取乳酸菌菌落在無菌的條件下繼續進行培養，該操作中常使用的接種工具是接種環。若在劃第二區域時，接種環灼燒后未冷卻。則會出現第一劃線區域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。