Question

【題目】三孢布拉霉菌能用來生產胡蘿卜素，但該菌株的高產性狀容易退化，需要定期篩選出高產菌株，研究表明菌體細胞內的[H]可將無色的 TTC 還原為紅色復合物，且菌體細胞內[H]含量越高，還原能力越強，胡蘿卜素合成能力也越強。請結合下列篩選菌株及提取胡蘿卜素的流程圖回答問題。

三孢布拉霉菌液→梯度稀釋→涂布到含有 TTC 的培養基上→挑取單菌落→擴大培養→收集菌絲并處理→萃取→鑒定

(1)工業生產上提取天然胡蘿卜素的方法主要有三種，除可利用上述微生物的發酵生產之外，還可以從植物中提取和從_________中獲取。萃取的效率主要取決于萃取劑的_________。萃取的最佳溫度和時間可以通過設置___________來摸索。

(2)將菌液涂布到含 TTC 的培養基上，目的是篩選出______________________，對照組需涂布等量的___________以判斷培養基是否被污染。挑取單菌落時，若菌落周圍___________，則菌株合成胡蘿卜素的能力較強。

(3)從該微生物中提取胡蘿卜素時，擴大培養后要收集菌絲進行的處理是粉碎和___________，以提高萃取效率。為了驗證萃取物是否是胡蘿卜素，該同學將葉綠素 b、葉綠素 a、葉黃素、萃取物和色素混合液（含葉綠素 b、葉綠素 a、葉黃素和胡蘿卜素）依次點樣在濾紙的 1、2、3、4、5 位置（如圖甲所示），并進行分離，濾紙條上各色素帶的位置_____________（填字母）時，即可說明該萃取物最可能是胡蘿卜素。

Answer 1

【答案】 (大面積養殖的)巖藻 性質和使用量 對照實驗 合成胡蘿卜素較強的菌體(或“高產菌株”) 無菌水 紅色較深 干燥 B

【解析】本題考查微生物的分離和培養、植物有效成分的提取相關知識，意在考察考生對知識點的識記理解掌握程度。

（1）工業生產上提取天然胡蘿卜素的方法主要有三種，除可利用上述微生物的發酵生產之外，還可以從植物中提取和從巖藻中獲取。萃取的效率主要取決于萃取劑的性質和使用量。萃取的最佳溫度和時間可以通過設置對照實驗來進行摸索。

(2)因為三孢布拉霉菌能用來生產胡蘿卜素，而且菌體細胞內的[H]可將無色的 TTC 還原為紅色復合物，高產菌株細胞內[H]含量越高，還原能力越強，胡蘿卜素合成能力也越強所以將菌液涂布到含 TTC 的培養基上，目的是篩選出合成胡蘿卜素較強的菌體。對照組需涂布等量的無菌水以判斷培養基是否被污染。挑取單菌落時，若菌落周圍紅色較深，說明產生的[H]高，進而說明菌株合成胡蘿卜素的能力較強。

(3)從該微生物中提取胡蘿卜素時，擴大培養后要收集菌絲進行的處理是粉碎和干燥，以提高萃取效率。根據題干說明5中肯定含有胡蘿卜素，而萃取物中要含有胡蘿卜素，在樣品1,2,3不應該有，而4和5應該有色素帶，根據圖形分析如果出現B中所示的色素帶時，說明萃取物中最可能含有胡蘿卜素。