Question

【題目】將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因?qū)�入棉花細胞中，可獲得抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因棉，其過程如下圖所示（注:農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)拉上只有T—DNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細胞中）。

（1）過程①需用同種____________酶對含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進行酶切。為將過程②獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來，應使用____________培養(yǎng)基。

（2）過程⑤中將棉花細胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓____________進入棉花細胞；除盡農(nóng)桿菌后，還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，目的是________________________。

（3）過程④中部分接種在無激素培養(yǎng)基上的芽也能長根，原因是_______________________。

（4）檢驗轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀，常用方法是____________。種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少__________的使用，以減輕環(huán)境污染。

Answer 1

【答案】限制性核酸內(nèi)切 選擇 T-DNA 篩選獲得T-DNA片段的植物細胞 頂芽端合成的生長素向基部運輸，促進根的分化 投放棉鈴蟲 農(nóng)藥

【解析】

分析圖形可知本題是基因工程和植物組織培養(yǎng)相結(jié)合培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植株的過程，基因表達載體的構(gòu)建是實施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。此過程要用相同的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，使之有相同的黏性末端，這樣才能連接。常用的導入受體植物細胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。

（1）為了使Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒可以連接，一般用相同的限制酶切割二者出相同的黏性末端。篩選出農(nóng)桿菌要用與標記基因?qū)�應的選擇培養(yǎng)基。

（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法利用的是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上有一段可轉(zhuǎn)移的T-DNA，將目的基因插入到T-DNA中，使之進入植物細胞的染色體DNA上，從圖中看出在Ti質(zhì)粒上有卡那霉素抗性基因，因此可以用含卡那霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)篩選獲得T-DNA片段的植物細胞。

（3）芽自身可以合成生長素向下運輸，促進根的分化。

（4）檢驗轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀可以用個體生物學水平鑒定，即投放棉鈴蟲看棉鈴蟲的生存狀態(tài)。種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉可以抵御棉鈴蟲的侵害，減少農(nóng)藥的使用，從而減輕環(huán)境污染。