Question

【題目】垃圾分類(lèi)、文明環(huán)保。某研究團(tuán)隊(duì)擬從餐廚垃圾中分離具有高效降解淀粉能力的微生物，并制成菌制劑用于餐廚垃圾高效無(wú)害化處理。對(duì)所取餐時(shí)垃圾浸泡液進(jìn)行產(chǎn)淀粉酶細(xì)菌的分離操作（A組）和計(jì)數(shù)操作（B組），過(guò)程如圖。請(qǐng)回答下列回題：

（1）步驟④，⑤所用培養(yǎng)基的成分，最大的區(qū)別是固體培養(yǎng)基中添加了______________，步驟③、④所用培養(yǎng)基的成分，最大的區(qū)別是______________種類(lèi)不同，步驟⑤、⑧接種時(shí)需設(shè)置未接種培養(yǎng)基做對(duì)照，目的是______________________________________________________________________。

（2）步驟⑧的接種方法是____________________________。取1 mL菌液稀釋1000倍，分別將0．1 mL的菌液涂布在4個(gè)平板上。經(jīng)培養(yǎng)后4個(gè)平板的菌落數(shù)分別是58、60、56和28，則發(fā)酵液中釀酒酵母的數(shù)量為______________個(gè)/mL。該統(tǒng)計(jì)結(jié)果往往低于實(shí)際活菌值，原因是______________________。

（3）從細(xì)菌體內(nèi)提取出來(lái)的淀粉酶首先要檢測(cè)______________，以便更好地將酶用于生產(chǎn)，還可采用固定化酶技術(shù)中的______________方法使酶能反復(fù)利用。

Answer 1

【答案】瓊脂 碳源 檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染 稀釋涂布平板法 5．8×105 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌連在一起時(shí)平板上觀察到的是一個(gè)菌落 酶的活性（活力） 物理吸附或化學(xué)結(jié)合

【解析】

檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)，題圖所示采用的計(jì)數(shù)方法是稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)；用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)時(shí)，在每一個(gè)梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，再通過(guò)計(jì)算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)。

（1）步驟④中為液體培養(yǎng)基，步驟⑤為接種在固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，兩者最大的區(qū)別是固體培養(yǎng)基中添加了瓊脂；步驟③為擴(kuò)大培養(yǎng)，而步驟④為選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)使用的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，因此所用的培養(yǎng)基的成分，最大的區(qū)別是碳源種類(lèi)不同，即選擇培養(yǎng)基中需要以淀粉作為唯一碳源；為檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染，步驟⑤、⑧接種時(shí)需設(shè)置未接種培養(yǎng)基做對(duì)照，通過(guò)比較空白培養(yǎng)基與接種培養(yǎng)基的菌落數(shù)目檢測(cè)污染情況。

（2）圖中步驟⑧接種后需要計(jì)數(shù)，故接種方法為稀釋涂布平板法；應(yīng)選擇均數(shù)在30300之間的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，故發(fā)酵液中釀酒酵母的數(shù)量為（58＋60＋56）/3÷0.1×1000=5．8×105個(gè)/mL；因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的是一個(gè)菌落，故用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)結(jié)果往往低于實(shí)際活菌值。

（3）從細(xì)菌體內(nèi)提取出來(lái)的淀粉酶首先要檢測(cè)酶的活性（活力），以便更好地將酶用于生產(chǎn)；固定化酶的方法主要有化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。