Question

下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點。

下圖是轉基因抗病香蕉的培育過程，含目的基因的外源DNA和質粒上的箭頭表示相關限制酶的酶切位點。請回答下列問題：

(1) 用圖中的質粒和目的基因構建重組質粒，不能使用SmaI酶切割，原因是__________________________________________。

(2) 構建含目的基因的重組質粒A時，選 用 BamhHI 和HindⅢ酶對_______和 _______進行切割，可以防止質粒和含目的基因的外源DNA片段自身環化。

(3) ①?⑤中存在堿基互補配對的是____________。

(4) 香蕉組織細胞具有__________，因此，可以利用組織培養技術將導入目的(抗病)基因的香蕉組織細胞培育成植株。圖中④、⑤依次表示組織培養過程中香蕉組織細胞的_________、____________。培養皿中的培養基除添加營養物質外，還需要添加_________和__________以誘導外植體完成④、⑤生理過程，培養成完整的植物體。在形成愈傷組織的過程中，細胞的新陳代謝類型是_____________。

(5) 如何檢測圖示過程最終是否取得成功？____________________________。

 

Answer 1

【答案】

（1）SmaI酶會破壞質粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因（2）外源DNA和質粒（3）①④⑤  （4）全能性 脫分化 再分化 生長素 細胞分裂素   異養需氧型（5）用蟲子感染轉基因香蕉，觀察是否抗蟲

【解析】

試題分析：

（1）質粒抗生素抗性基因為標記基因，由圖可知，標記基因和外源DNA目的基因中均含有SmaI酶切位點，都可以被SmaI酶破環，故不能使用該酶剪切質粒和含有目的基因的DNA。

(2) 構建含目的基因的重組質粒A時，選用 BamhHI 和HindⅢ酶對外源DNA和質粒進行切割，這樣使目的基因兩端的黏性末端不同，可以防止含目的基因的外源DNA片段自身環化，同理，也可以防止質粒自身環化。

(3)— (4)圖中①是構建基因表達載體，存在堿基互補配對；②③是利用農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞，不存在堿基互補配對；④和⑤表示植物組織培養，原理是香蕉組織細胞具有全能性，其中④表示脫分化，⑤表示再分化，這兩個過程都在進行有絲分裂，所有都存在堿基互補配對；培養皿中的培養基除添加營養物質外，還需要添加生長素和細胞分裂素。在形成愈傷組織的過程中，細胞的新陳代謝類型是異養需氧型。故①?⑤中存在堿基互補配對的是①④⑤。

(5)可以從個體水平鑒定圖示過程最終是否取得成功，其鑒定方法為：用蟲子感染轉基因香蕉，觀察是否抗蟲。

考點：本題考查基因工程和植物組織培養的相關知識。

點評：本題以抗病香蕉味素材，考查基因工程和植物組織培養的相關知識，意在考查考生的理解能力、識記能力和應用能力。