Question

【題目】人組織纖溶酶原激活物(htPA)是一種重要的藥用蛋白，可在轉htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：

(1)從______________中可獲取不具有啟動子的htPA基因，再通過________技術使其數量大量增加。

(2)過程①需將 htPA基因與載體用________________切割后，再通過________________連接，來構建____________________。

(3)過程②常用______________技術將目的基因導入受體細胞中，受體細胞通常采用____________。

(4)為了在羊乳中獲取目的基因表達產物，還需要在目的基因的首端加上特殊的調控組件：_______________________。欲知羊乳中是否含有人組織纖溶酶原激活物，需使用_______________對其進行檢驗。

Answer 1

【答案】cDNA文庫（部分基因文庫） PCR 同種限制酶 DNA連接酶 基因表達載體 顯微注射 受精卵 乳腺蛋白基因的啟動子 相應抗體

【解析】

據圖分析，①表示基因表達載體的構建，②表示將目的基因導入受體細胞，③表示早期胚胎培養，④表示胚胎移植，⑤表示妊娠分娩獲得轉基因母羊，⑥表示從分泌的羊乳中獲取htPA。

（1）從cDNA文庫中獲得的目的基因（htPA）是經過反轉錄獲得的，母羊啟動子；利用PCR技術可以獲得大量的htPA基因。

（2）過程①表示基因表達載體的構建，先用同一種限制酶切割htPA基因與載體，在利用DNA連接酶將兩者連接起來構成基因表達載體。

（3）②表示將目的基因導入受體細胞（動物細胞），常用的受體細胞是受精卵，常用的方法是顯微注射法。

（4）根據題意分析，為了在羊乳中獲取目的基因表達產物，應該將目的基因與乳腺蛋白基因的啟動子組合在一起；檢測目的基因的產物一般用抗原-抗體雜交技術，因此欲知羊乳中是否含有人組織纖溶酶原激活物，需使用相應抗體對其進行檢驗。