Question

【題目】蘇云金桿菌(Bt)能產生具有殺蟲能力的毒素蛋白。圖1是轉Bt毒素蛋白基因植物的重組DNA形成過程示意圖；圖2是毒素蛋白基因進入植物細胞后發生的兩種生物大分子合成的過程，據圖回答下列問題。

（1）將圖1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反應管中有_____種DNA片段。過程②需要用到DNA連接酶，與T4 DNA連接酶相比，E.coli DNA連接酶在作用上的不同是________________

（2）圖1中形成重組質粒時可用HindⅢ和BamH Ⅰ進行切割后連接，與用一種酶（BamH Ⅰ）酶切后連接相比，這樣做的好處是______________________________。（列出2點）

（3）圖2中鏈是______。不同組織細胞的相同DNA進行過程③時啟用的起始點______（“都相同”、“都不同”、“不完全相同”），其原因是__________________。

（4）要想檢測Bt毒蛋白基因是否翻譯成蛋白質，在分子水平上可用______法進行檢測。

Answer 1

【答案】4種，E.coli DNA連接酶只能將雙鏈DNA片段互補的粘性末端連接起來 防止目的基因或質粒自連 防止目的基因和質粒的任意連接 mRNA 不完全相同 不同組織細胞中基因會進行選擇性表達 抗原-抗體雜交

【解析】

本題以轉Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖為載體，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能結合圖中信息準確答題，屬于中等難度題。1.由于HindⅢ與BamHⅠ兩種限制酶酶切形成的黏性末端不一樣，圖中①中的DNA同時被這兩種限制酶切割后產生四種基因片段；2.圖2表示基因的表達，DNA轉錄形成信使RNA（α鏈），翻譯形成多肽鏈。

（1）圖中①的DNA含有兩個BamHⅠ酶的切割位點，含有一個HindⅢ酶的切割位點，所以用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切①中的DNA后，反應管中有4種DNA片段，與T4DNA連接酶相比，E.coli DNA連接酶在作用上的不同是E.coli DNA連接酶只能將雙鏈DNA片段互補的粘性末端連接起來。
（2）形成重組質粒時可用HindⅢ和BamHⅠ進行切割后連接，與用一種酶（BamHⅠ）酶切后連接相比，可以防止目的基因和質粒的自身環化、防止目的基因和質粒的任意連接。
（3）從圖2可知，a鏈形成是以DNA一條鏈作為模板進行轉錄形成的信使RNA分子；不同組織細胞的相同DNA在轉錄時，如果是相同基因一般轉錄起點相同，不同的基因轉錄起點不同，原因是基因的選擇性表達。
（4）要想檢測Bt毒蛋白基因是否翻譯成蛋白質，在分子水平上可用抗原-抗體雜交。