Question

【題目】EPO是促紅細胞生成素（Erythropoietin）的英文簡稱，是一種激素樣物質，可促進體內新紅細胞生成。人類已可通過基因工程合成EPO基因，并采用中國倉鼠卵巢（CHO）細胞表達系統來獲取產物。其過程如下：

請回答下列問題：

（1）從人體組織中提取EPO的mRNA，通過逆轉錄得到 ，再通過PCR技術獲得大量EPO基因。

（2）供體母鼠通常情況下每次排卵8～12枚，為使其超數排卵，需注射 激素以排出更多的卵子，培養到 時期與獲能的精子相遇時，精子首先發生 反應，穿越放射冠和透明帶，完成體外受精。

（3）①過程構成了基因表達載體，內部包括不可缺少的組成部分，其中 能驅動基因的轉錄。

（4）采用 技術，將重組表達載體導入小鼠受精卵中，將受精卵移入發育培養液中繼續培養。培養液成分除一些無機鹽和有機鹽類外，還需添加 、激素、氨基酸、核苷酸等營養成分，以及血清（血漿）等物質。

（5）當胚胎發育至 時期，向受體移植，為獲得更多個轉基因胚胎，要將 進行均等切割，否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發育。此外，移植前需對已成功轉入目的基因的胚胎進行 。

（6）若想檢驗轉基因倉鼠是否成功表達EPO，可以采用 技術對血液來進行檢測。

Answer 1

【答案】

（1）cDNA（1分）

（2）促性腺 減數第二次分裂中期 頂體 （每空1分）

（3）啟動子 （1分）

（4）顯微注射技術 維生素（每空1分）

（5）桑椹胚或囊胚 內細胞團 性別鑒定（每空2分）

（6）抗原—抗體雜交（2分）

【解析】

試題分析：

（1） 獲取EPO基因（目的基因），可從人體組織中提取EPO的mRNA，通過逆轉錄得到cDNA，再經PCR技術擴增。

（2） 為使供體母鼠超數排卵，需注射促性腺激素。采集的卵母細胞需培養到減數第二次分裂中期才具備受精能力。當卵子與獲能的精子相遇時，精子首先發生頂體反應，穿越放射冠和透明帶，完成體外受精。

（3） 基因表達載體的組成部分中，能驅動基因轉錄的是啟動子。

（4） 將重組表達載體導入小鼠受精卵中，通常采用顯微注射技術。發育培養液的成分除一些無機鹽和有機鹽類外，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養成分，以及血清（血漿）等物質。

（5）胚胎移植時，應選擇發育到桑椹胚或囊胚階段的胚胎。借助胚胎分割技術可獲得更多的轉基因胚胎，胚胎分割時，需要將內細胞團進行均等切割，否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發育。依題意“采用中國倉鼠卵巢（CHO）細胞表達系統來獲取產物”可推知，在胚胎移植前，需對已成功轉入目的基因的胚胎進行性別鑒定。

（6） 若想檢驗轉基因倉鼠是否成功表達EPO，可以采用抗原—抗體雜交技術對血液來進行檢測。