Question

【題目】餐廚垃圾廢液中的淀粉、蛋白質、脂肪等微溶性物質可以被微生物分解并利用，但由于初期有益微生物數量相對較少，存在發酵周期長、效率低等缺點，極易對環境造成污染。

（1）為探究圓褐固氮菌和巨大芽孢桿菌處理某餐廚垃圾廢液的最佳接種量比，來制備微生物菌劑，研究者做了如下實驗：

①將兩種菌液進行不同配比分組處理如下表所示：

編號	R0	R1	R2	R3
圓褐固氮菌：巨大芽孢桿菌	1：0	0：1	1：1	2：1

將上表菌液分別接種于l00mL__________中進行振蕩培養，振蕩處理的目的是__________。本實驗還需設置對照組為__________。

②培養3天后測定活菌數，取一定量菌液進行__________稀釋，然后分別取0. 1mL的菌液采用__________法接種于基本培養基中培養。進行計數時，可依據__________對兩種菌進行區分，并選取菌落數在__________內的平板。實驗結果如下圖所示，由實驗結果可知__________。

（2）為進一步探究菌種比例對該餐廚垃圾廢液中蛋白質、脂肪等有機物的降解效果，測得15天內廢液中蛋白質、脂肪的含量變化如下圖所示：

由實驗結果可知分別選取__________的接種比對該餐廚垃圾廢液中蛋白質、脂肪降解效果最好。廢液中個別組蛋白質含量在后期升高，分析可能的原因是__________。

Answer 1

【答案】某餐廚垃圾廢液 供氧、目的菌與培養液充分接觸 接種等量無菌水 梯度 涂布 菌落形態 30～300 兩種菌混合接種時有效菌落數均大于單獨接種；兩菌種接種量比例為1：1時，廢液中兩種菌種的有效活菌數能夠實現同步最大化 R3、R1 隨著固氮菌和芽孢桿菌的大量繁殖其產生的蛋白酶及脂肪酶等導致蛋白質含量增加或者兩種菌的不同配比，產生的蛋白酶的種類不同

【解析】

常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。

在統計菌落數目時，為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30-300的平板進行計數。

（1）①要探究圓褐固氮菌和巨大芽孢桿菌處理某餐廚垃圾廢液的最佳接種量比，故需要將不同配比的菌液接種在100mL某餐廚垃圾廢液中，為了保證氧氣供應及目的菌與培養液充分接觸，需要進行振蕩培養。另外為了減小誤差，還需要設置對照組，接種等量無菌水。

②培養3天后要測定活菌數，需要進行稀釋涂布平板法進行接種，故需要取一定量菌液進行梯度稀釋，然后分別取0. 1mL的菌液采用涂布法接種于基本培養基中培養�？梢愿鶕�菌落的形態區分兩種菌，為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30-300的平板進行計數。根據實驗數據可知，兩種菌混合接種時有效菌落數均大于單獨接種，且兩菌種接種量比例為1：1時，廢液中兩種菌種的有效活菌數能夠實現同步最大化。

（2）由實驗數據可知，R3接種組隨著時間的延長，蛋白質的含量下降最明顯；R1接種組隨著處理時間的延長，脂肪的含量下降最明顯，即脂肪的降解效果最好。隨著固氮菌和芽孢桿菌的大量繁殖其產生的蛋白酶及脂肪酶等導致蛋白質含量增加或者兩種菌的不同配比，產生的蛋白酶的種類不同，均會導致廢液中個別組蛋白質含量在后期升高。