Question

【題目】尿素是一種重要的農業肥料，但若不經細菌的分解，就不能很好地被植物利用。同學們設計了以下實驗來探究土壤中微生物對尿素的分解作用，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌（目的菌）。培養基成分及操作過程如下所示。（10分）

回答問題：

（1）制備培養基的一般步驟：計算→稱量→溶化→定容→調整PH→ →倒平板

（2）培養基的類型很多，但培養基中一般都含有 、氮源、水和無機鹽，上述培養基中“目的菌”生長所需的碳源和氮源分別是 和 ，從用途劃分這種培養基屬于

培養基，而從物理性質的角度劃分屬于 培養基。

（3）分離純化微生物最常使用的接種方法是__ __和___ ___兩種。

（4）為充分說明上表所示培養基具有選擇作用，應配制牛肉膏蛋白胨培養基作為實驗對照，如果該培養基上的菌落數明顯 （選填“多于”或“少于” ）表中培養基中的菌落數目，說明表中培養基已篩選出一些目的菌。

（5）對分離的菌種進行鑒定時，需要在上述培養基中加入酚紅指示劑，細菌合成的脲酶 將尿素分解為氨，pH增高，使指示劑變 。

Answer 1

【答案】（1）滅菌 （2）碳源 葡萄糖 尿素 選擇 固體 （3）平板劃線法 稀釋涂布平板法 （4）多于 （5）紅色

【解析】（1）制備培養基的一般步驟：計算→稱量→溶化→定容→調整PH→滅菌→倒平板。（2）培養基的類型很多，但培養基中一般都含有碳源、氮源、水和無機鹽。“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別有含氮元素的尿素和含碳元素的葡萄糖提供。按功能不同，培養基可分成兩類，鑒別培養基和選擇培養基，培養基中不加其它氮素，只把尿素作為唯一氮源，其目的是想從眾多微生物中選出能分解尿素的目的菌，所以屬于選擇培養基。按物理性質分，上述培養基添加了較多的瓊脂，所以屬于固體培養基。（3）分離純化微生物最常使用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種。（4）為充分說明上表所示培養基具有選擇作用，應配制牛肉膏蛋白胨培養基作為實驗對照，如果該培養基上的菌落數明顯多于表中培養基中的菌落數目，說明表中培養基已篩選出一些目的菌。（5）目的菌之所以能利用尿素，是因為體內的脲酶能將尿素分解成氨，氨可以作為細菌的氮源，同時會使培養基的pH升高，升高的PH會使酚紅指示劑變為紅色，因此可以通過檢測培養基pH的變化來判斷尿素是否被分解。