Question

【題目】馬鈴薯塊莖含有大量的淀粉，富含多種維生素和無機鹽，我國已將馬鈴薯作為主糧產品進行產業化開發。下圖是轉基因抗鹽馬鈴薯的培育過程，請分析回答問題：

（1）為獲取抗鹽基因，可以從堿蓬細胞研磨液中提取抗鹽基因的 來合成cDNA。

（2）上圖構建基因表達載體時，最好選用 酶切割含目的基因的外源DNA和質粒，以防止目的基因、質粒自身環化，但不能使用Sma l切割的原因是 。構建好的重組質粒在抗鹽基因前要加上特殊的啟動子，啟動子是一段有特殊序列的 片段。

（3）將基因表達載體導入農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA上的原因是 。通過農桿菌的轉化作用，使抗鹽基因插入到馬鈴薯細胞中的染色體DNA上，從而使抗鹽基因的遺傳特性得以 。

（4）上圖轉基因抗鹽馬鈴薯培育過程中，屬于脫分化階段的是 （填序號）。從個體生物學水平上檢驗轉基因抗鹽馬鈴薯是否培育成功的方法是 。

Answer 1

【答案】（1）mRNA（1分） （2）EcoRⅠ和HindⅢ SmaⅠ會破壞質粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因 DNA （3）T-DNA是可以轉移的DNA 穩定維持和表達 （4）⑤ 將轉基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長

【解析】（1）cDNA是逆轉錄合成的DNA片段，需要從供體細胞中提取目的基因轉錄的mRNA為模板。（2）在構建基因表達載體過程中，選擇限制酶的原則是不能破壞目的基因和質粒上的標記基因且能將目的基因兩端以及質粒同時切割開來，所以可以選擇EcoRⅠ和HindⅢ，不能使用Sma l切割的原因是SmaⅠ會破壞質粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因。構建好的重組質粒在抗鹽基因前要加上特殊的啟動子，啟動子是一段有特殊序列的DNA片段。（3）將基因表達載體導入農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA上的原因是T-DNA是可以轉移的DNA。通過轉化作用，使抗鹽基因插入到馬鈴薯細胞中的染色體DNA上，從而使抗鹽基因的遺傳特性得以穩定維持和表達。（4）上圖轉基因抗鹽馬鈴薯培育過程中，⑤是脫分化階段，⑥是再分化階段。從個體生物學水平上檢驗轉基因抗鹽馬鈴薯是否培育成功的方法是將轉基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長。