Question

【題目】長期使用除草劑會污染環境，研究發現一除草劑（有機物）能被土壤中某細菌（M）降解．如圖為分離能降解該除草劑的M菌種的過程．請回答下列相關問題：
（1）在液態培養基的基礎上制備固體培養基時常用的凝固劑是 ．
（2）土壤有“微生物的天然培養基”之稱．為了獲取能降解該除草劑的M菌種，選擇的土壤樣品應來自 ． 圖中①過程所用的培養基中需要加入作為唯一碳源．進行選擇培養的目的是 ．
（3）圖中②過程劃線所用的工具為 ， 該工具在使用前后都要進行滅菌．
（4）若要檢測土樣中的細菌含量，應采用法進行接種．先將1mL土壤溶液稀釋100倍，然后隨機選取4個經滅菌處理的平板，其中3個平板上分別涂布0.1mL稀釋液，1個平板未涂布稀釋液，適當培養后，4個平板上的菌落數分別為39、38、37和0，則可計算得出每升土壤溶液中的活菌數為個．

Answer 1

【答案】
（1）瓊脂
（2）該除草劑嚴重污染的土壤；該除草劑；增加目的菌的濃度
（3）接種環；灼燒
（4）稀釋涂布平板；3.8×107
【解析】解：（1）在液態培養基的基礎上，制備固體培養基時需要用瓊脂作為凝固劑．（2）根據題意可知，“研究發現一除草劑（有機物）能被土壤中某細菌（M）降解”，因此為了獲取能降解該除草劑的M菌種，選擇的土壤樣品應來自該除草劑嚴重污染的土壤．圖中①過程為選擇培養，因此所用的培養基中需要加入該除草劑作為唯一碳源．進行選擇培養的目的是增加目的菌的濃度．（3）圖中②過程表示平板劃線法，劃線一般用接種環，該工具在使用前后都要進行灼燒滅菌．（4）若要檢測土樣中的細菌含量，應采用稀釋涂布平板法進行接種．用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數時，在每一個梯度濃度內，至少要涂布3個平板，選擇菌落數在30～300的進行記數，求其平均值，再通過計算得出土壤中細菌總數，可計算得出每升土壤溶液中的活菌數為=（39+38+37）÷3÷0.1×100×1000=3.8×107個．

故答案為：（1）瓊脂（2）該除草劑嚴重污染的土壤；該除草劑；增加目的菌的濃度（3）接種環；灼燒 （4）稀釋涂布平板；3.8×107

1、無菌技術的主要內容

①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒；

②將用于微生物培養的器皿、接種用具和培養基等器具進行滅菌

③為避免周圍環境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行；

④實驗操作時應避免已經滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸．2、微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落．

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落．