Question

【題目】空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板（培養基）收集教室空氣中的微生物，以了解教室內不同高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟如下：

①配制培養基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）；

②制作無菌平板（培養基）；

③設置空白對照組和若干實驗組，進行相關操作；

④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養一段時間，統計各組平板上菌落的平均數。

請回答下列問題：

（1）該培養基中微生物所需的氮源是_____________，成分X通常是____________。

（2）步驟③中，實驗組的操作是將不同平板分別置于教室中的_______________，敞口靜置一段時間。

（3）若在某次調查中，某一高度實驗組平板上菌落平均數為36個/平板，而空白對照組的一個平板上出現了6個菌落，這種結果說明在此次調查中培養基出現了____________現象。若將30（即36－6）個/平板作為本組菌落數的平均值，該做法_________（填“正確”或“不正確”）。

（4）若想確定平板上的菌落是否有大腸桿菌，應在培養基中加入________________；若要篩選出空氣中的真菌，應加入__________________。

枯草芽孢桿菌廣泛分布在含淀粉豐富的土壤中。若要從土壤中分離篩選出能高效降解淀粉的枯草芽孢桿菌，另一研究小組做了如下實驗：

①制備土壤稀釋液：取土樣與水充分混合，放入錐形瓶中，常壓80℃的水浴處理樣品1小時后，取出冷卻。然后制成10-1、10-2 、10-3、10-4、10-5不同稀釋度的土壤溶液。

②用無菌滴管吸取1ml10-5菌液，用____________法接種于以____________為唯一碳源的平板上。

③將平板于37°C培養箱中培養1—3d后，加入碘液，觀察菌落周圍白色區域，如下圖所示。

（5）若要大規模產業化該淀粉酶，則首選的菌株是________。

Answer 1

【答案】牛肉膏、蛋白胨 瓊脂 不同高度 雜菌污染 不正確 伊紅美藍 抗生素（或青霉素等） 涂布（平板）法 淀粉 B

【解析】

微生物培養基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求，對異養微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養要素成分時并不是起單一方面的作用。微生物的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。

（1）牛肉膏和蛋白胨都含有蛋白質的水解產物，都可以作為氮源；平板為固體培養基，故需要加入凝固劑瓊脂。

（2）實驗探究的是教室內不同高度空氣中微生物的分布，其中自變量為不同高度，故需在不同高度下放置開蓋平板。

（3）在完全正確的操作情況下，空白對照組中不應出現菌落，若出現菌落，說明操作過程中存在微生物污染，屬于實驗失誤，所有實驗數據均不應采用，如果采用了做法是不正確的。

（4）鑒別大腸桿菌常用伊紅和美藍，這種培養基稱為鑒別培養基，若要篩選出空氣中的真菌，應加入抗生素。根據實驗步驟可知，實驗將土壤溶液稀釋成不同濃度，并且實驗目的為從土壤中分離篩選出能高效降解淀粉的枯草芽孢桿菌，因此需要用無菌滴管吸取1ml10-5菌液，用稀釋涂布平板法法接種于以淀粉為唯一碳源的平板上。

（5）若要大規模產業化該淀粉酶，需要選取產生淀粉酶最多的菌株，而圖中B的透明圈最大，因此B菌落產生的淀粉酶最多，因此首選的菌株是B。