Question

【題目】如圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序為1→2→3→4→5。下列操作方法正確的是（ ）

A.操作前只要將接種環燒紅并冷卻后，就可離開酒精燈，進行接種試驗

B.劃線操作須在火焰上進行，以免雜菌污染

C.所需菌落只能在5區域中才可以得到

D.在1、2、3、4、5區域中劃線前后都要對接種環滅菌

Answer 1

【答案】D

【解析】

平板劃線的操作的基本步驟是：
1、右手持接種環，經火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口過火焰，將以冷卻的接種環伸入菌液，沾取一環菌液，將試管口過火焰丙塞上棉塞。
2、左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處將接種環迅速伸入平板內，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環不應劃破培養基表面。
3、燒灼接種環，殺滅環上殘留菌液，待冷卻（是否冷卻，可先在培養基邊緣處試觸，若瓊脂溶化，表示未涼，稍等再試），從第一區域劃線的末端開始往第二區內劃線，重復以上操作，在第三四五區內劃線，注意不要將最后一區的劃線與第一區相連。
4、將平板倒置，放入培養箱中培養。

A、在每次劃線前后都要對接種環進行灼燒滅菌，冷卻后，在酒精燈火焰旁邊，進行接種試驗，A錯誤；
B、接種時劃線操作是在火焰周圍進行，B錯誤；
C、在5個區域中，只要有單個活細菌，通過培養即可獲得所需菌落，C錯誤；
D、在1、2、3、4區域中劃線前都要對接種環進行灼燒滅菌，保證每次劃線的菌種來自上一區域的末端，5區域劃線前都要對接種環進行灼燒滅菌目的是防止雜菌污染，1區域劃線后進行灼燒滅菌是防止污染環境及操作者，D正確。
故選D。