Question

【題目】苯酚及其衍生物廣泛存在于工業廢水中，對環境有嚴重危害。小明同學準備依據如圖操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題：

（1）酚降解菌富集培養基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作為碳源的有________。

（2）將采集到的樣品接種培養，苯酚用量應隨轉接次數增加而逐漸________，以達到富集酚降解菌的目的；若如圖平板中菌落過于密集，應進一步________，以便于菌落計數與分離；制備平板培養基時除了需要水、營養物質外，還必須添加________。

（3）如圖為連續劃線法示意圖，在圖中________（填圖中序號）區域更易獲得單菌落。

（4）若選擇培養的是纖維素分解菌，為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行________的實驗，測定其分解濾紙等纖維素后所產生的________進行定量測定。

Answer 1

【答案】蛋白胨、苯酚 增加 梯度稀釋（稀釋涂布） 凝固劑（瓊脂） ③ （發酵）產纖維素酶 葡萄糖

【解析】

平板劃線法時將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養，在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。為確定得到的微生物是纖維素分解菌，還需進行發酵產纖維素酶的實驗，纖維素酶的發酵方法有液體發酵和固體發酵兩種，纖維素酶的測定方法，一般是對纖維素酶分解濾紙等纖繼素后所產生的葡萄糖進行定量測定。

（1）酚降解菌富集培養基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作為碳源的有蛋白胨、苯酚。

（2）分析實驗可知，實驗目的是篩選酚降解菌，因此將采集到的樣品接種培養，苯酚用量應隨轉接次數增加而逐漸增加，以達到富集酚降解菌的目的；若圖1平板中菌落過于密集，應進一步稀釋涂布，以便于菌落計數與分離；平板培養基屬于固體培養基，該培養基需要加入瓊脂作為凝固劑。

（3）圖2為平板劃線法，隨著劃線次數的增加，菌種進一步被稀釋，因此圖中③區域更易獲得單菌落。

（4）若選擇培養的是纖維素分解菌，為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行發酵產纖維素酶的實驗，對其分解濾紙等纖維素后所產生的葡萄糖進行定量測定。