Question

【題目】淀粉酶在工業生產上應用最早，迄今仍是用途最廣、產量最大的酶制劑產品之一。為了提高淀粉酶的生產水平，首先要從土壤中篩選出產淀粉酶的活性菌株。某研究人員對所取土樣進行產淀粉酶的細菌的分離操作（A組）和計數操作（B組），過程如圖Ⅰ。圖Ⅱ是一種接種方法示意圖。請回答下列問題：

（1）步驟③、④所用培養基的成分，最大的區別是______種類不同。

（2）步驟④、⑤所用培養基的成分，最大的區別是固體培養基中添加了______。步驟⑤、⑧接種時需設置未接種培養基做對照，目的是______。

（3）步驟⑦中，將1mL菌液分別稀釋10倍和100倍，每種稀釋度經過步驟⑧各在3個平板上接種（每個平板的接種量為0.1mL），經適當培養后，2組平板上的菌落數分別為59、57、58和2、7、5。據此可得出每升菌液中的活菌數為______個，據此可推測適宜的土壤稀釋倍數為______倍。

（4）圖Ⅱ所用的接種方法______（填“能”或“不能”）對活菌進行計數；甲、乙、丙為劃線的三個區域，為正確完成整個接種過程，接種環要進行______次灼燒滅菌，其中滅菌目的相同的是第______次。

Answer 1

【答案】碳源 瓊脂 檢測培養基是否被污染 5.8×106 10 不能 4 第二、三次

【解析】

步驟①所用的小鐵鏟需采用干熱滅菌法進行滅菌處理；步驟②為無菌水制成的菌液；步驟③為擴大培養；步驟④為選擇培養；步驟⑤為固體培養基接種；步驟⑦⑧⑨為微生物的分類計數；II為平板劃線法。

（1）步驟③為擴大培養，而步驟④為選擇培養基，選擇培養使用的培養基為選擇培養基，因此所用的培養基的成分，最大的區別是碳源種類不同，即選擇培養基中需要以淀粉作為唯一碳源。

（2）步驟④為液體培養基，步驟⑤為固體培養基，兩者的主要區別是固體培養基中需添加瓊脂成分；為檢測培養基是否被污染，步驟⑤、⑧接種時需設置未接種培養基做對照；

（3）應選擇數目在30-300之間的平板進行計數，故稀釋倍數是10的濃度較為合適，每升菌液中的活菌數為（59＋57＋58）/3÷0.1×10×103=5.8×106 個；

（4）圖Ⅱ所用的接種方法為平板劃線法，該方法不能對活菌進行計數；據圖分析，共甲、乙、丙為劃線的三個區域，為正確完成整個接種過程，劃線前及劃線結束都要進行灼燒滅菌，共4次，其中第二、三次均是為了殺滅接種環上的存留的菌種，兩次目的相同。