Question

【題目】對艾滋病的疫苗研究，經歷了三個“時代”．早期，科學工作者從HIV感染自愈者體內采取相應免疫細胞，使之與骨髓瘤細胞結合，生產HIV的抗體，具體過程見下圖1：

隨后，轉基因技術被運用到了HIV的疫苗的研制工作中，科學工作者研制的第二代HIV疫苗的操作簡要路徑見下圖2：

科學工作者發現一種蛋白質（D4﹣Ig），它能與HIV表面的糖蛋白結合，從而使HIV失去侵染T細胞的能力；腺相關病毒是桿狀病毒，無激活復制基因，對人體相對安全．
腺相關病毒其基因組中含有常用病毒衣殼基因rep和復制相關蛋白基因cap，為安全起見，需要去除復制基因．目前，科學家利用其相關實驗研究，實驗工作相關信息如圖4：

（1）上述過程①的生物技術稱為技術；
（2）要獲得純凈、單一的抗體，上圖過程最關鍵的操作要點是 ．
（3）過程②所用限制酶必須一致，其理由是 ．
（4）用該方法產生的疫苗進行接種，與上述圖1的抗體注射方法的免疫功能相比，其關鍵的優勢是；
（5）該疫苗接種，具有一定的HIV防疫作用，但不能治愈HIV感染者，從免疫學角度分析，不能治愈的主要原因是 ．
（6）用X，Y兩種限制酶作用于病毒DNA片段，并進行電泳分析，其結果見圖3．

A至D選項中，關于兩種酶切位置的判斷正確的是
（7）目的基因運載體是 ．
（8）過程①需要對D4﹣Ig蛋白進行 ， 才能人工合成D4﹣Ig基因．這個過程產生的基因組可能在某些堿基上有所不同，其原因是
（9）被兩種病毒雙重感染的T細胞解體的HIV病毒相比入侵時的差異是 ．

Answer 1

【答案】
（1）細胞融合
（2）單個免疫B細胞與重骨髓瘤細胞融合或在選擇培養基上進行選擇
（3）只要切口和接口具有相同的粘性末端即可
（4）血液中抗體含量因代謝會逐漸降低，而抗原可以激發B細胞產生記憶細胞，較長時間維持較高抗體濃度
（5）HIV寄生于細胞內，抗體只能應對內環境體液中的病毒
（6）C
（7）腺相關病毒（或腺相關病毒粒子和腺相關病毒基因組）
（8）氨基酸種類與序列測定；有些氨基酸會有2種以上的密碼子
（9）HIV病毒的衣殼蛋白已經與D4﹣Ig蛋白結合，失去再感染T細胞能力
【解析】解：（1）上述①為HIV自愈者免疫細胞與骨髓瘤細胞融合的過程，該過程需要采用細胞融合技術．（2）要獲得純凈、單一的抗體，最關鍵的操作要點是單個免疫B細胞與重骨髓瘤細胞融合或在選擇培養基上進行選擇．（3）②是基因表達載體的構建過程，該過程需要用同種限制酶切割外源DNA片段和質粒，以產生相同的黏性末端，只要切口和接口具有相同的黏性末端即可被DNA連接酶連接．（4）用該方法產生的疫苗進行接種，與上述圖1的抗體注射方法的免疫功能相比，其關鍵的優勢是血液中抗體含量因代謝會逐漸降低，而抗原可以激發B細胞產生記憶細胞，較長時間維持較高抗體濃度；（5）HIV寄生于細胞內，抗體只能應對內環境體液中的病毒，因此該疫苗接種，具有一定的HIV防疫作用，但不能治愈HIV感染者．（6）A、用X酶單獨切割能形成500、5000和4500三種大小的片段，這與圖3不符，A錯誤；
B、用Y酶單獨切割能形成500和9500兩種大小的片段，這與圖3不符，B錯誤；
C、用X酶單獨切割能形成3500、6000和500三種大小的片段，用Y酶單獨切割能形成8000和2000兩種大小的片段，用X酶和Y酶同時切割能形成4500、3500、1500和500四種大小的片段，這與圖3相符，C正確；
D、用Y酶單獨切割能形成1500和8500兩種大小的片段，這與圖3不符，D錯誤．
故選：C．（7）由圖可知，目的基因運載體是腺相關病毒（或腺相關病毒粒子和腺相關病毒基因組）．（8）過程①是采用人工合成法獲得目的基因，該過程需要對D4﹣Ig蛋白進行氨基酸種類與序列測定，才能人工合成D4﹣Ig基因．這個過程產生的基因組可能在某些堿基上有所不同，其原因是密碼子具有簡并性，即有些氨基酸會有2種以上的密碼子．（9）根據題干信息“蛋白質（D4﹣Ig），它能與HIV表面的糖蛋白結合，從而使HIV失去侵染T細胞的能力”可知，被兩種病毒雙重感染的T細胞解體的HIV病毒相比入侵時的差異是HIV病毒的衣殼蛋白已經與D4﹣Ig蛋白結合，失去再感染T細胞能力．
所以答案是：（1）細胞融合（2）單個免疫B細胞與重骨髓瘤細胞融合或在選擇培養基上進行選擇（3）只要切口和接口具有相同的粘性末端即可（4）血液中抗體含量因代謝會逐漸降低，而抗原可以激發B細胞產生記憶細胞，較長時間維持較高抗體濃度（5）HIV寄生于細胞內，抗體只能應對內環境體液中的病毒．（6）C（7）腺相關病毒（或腺相關病毒粒子和腺相關病毒基因組）（8）氨基酸種類與序列測定 有些氨基酸會有2種以上的密碼子（9）HIV病毒的衣殼蛋白已經與D4﹣Ig蛋白結合，失去再感染T細胞能力
【考點精析】掌握基因工程的原理及技術和單克隆抗體的制備是解答本題的根本，需要知道基因工程的原理是利用DNA重組技術；對免疫小鼠注射特定的抗原蛋白；提取B淋巴細胞；同時用動物細胞培養的方法培養骨髓瘤細胞并提�。淮偈顾鼈兗毎�融合；在特定的選擇培養基上篩選出融合的雜種細胞；然后對它進行克隆化培養和抗體檢測；最后將雜交瘤細胞在體外做大規模培養或注射入小鼠腹腔內增殖，從細胞培養液或小鼠腹水中可得到大量的單克隆抗體．