Question

【題目】我國首例綠色熒光蛋白轉基因克隆豬在東北農業大學的種豬場自然分娩產出，這標志著我國在轉基因克隆豬技術領域已達到世界領先水平。下圖為我國首例綠色熒光蛋白轉基因克隆豬的培育過程示意圖，請據圖回答：

（1）一個完整的基因表達載體除了帶有綠色熒光蛋白基因以外，還必須含有復制原點、啟動子、終止子和________________。啟動子是一段有特殊結構的DNA片段，它是___________酶識別和結合的部位；而起始密碼子的化學本質則是________（DNA或RNA）。

（2）過程③將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞后，要通過DNA分子雜交技術，來檢測綠色熒光蛋白基因是否已重組到豬胎兒成纖維細胞的__________________上。

（3）從豬中取胎兒成纖維細胞，用__________________處理，然后進行分散培養。培養時，將培養瓶置于含一定量CO2的培養箱中進行培養，CO2的作用是_____________。

（4）過程④表示通過顯微操作法吸出卵母細胞中的細胞核，微型吸管除了將細胞核吸除外，往往還要將__________________一并吸出。

（5）本實驗所用到的現代生物科學技術有____________________________（填序號）。

A.動物細胞培養 B.胚胎移植

C.胚胎細胞核移植 D.DNA重組技術

Answer 1

【答案】 標記基因 RNA聚合 RNA 染色體DNA 胰蛋白酶（或膠原蛋白酶） 維持培養液的pH 第一極體 ABD

【解析】試題分析：據圖分析，①表示獲取綠色熒光蛋白基因，②表示基因表達載體的構建，③表示將目的基因導入受體細胞，④表示去除卵母細胞的細胞核，⑤表示核移植，⑥表示早期胚胎的培養，⑦表示胚胎移植，⑧表示妊娠分娩獲得綠色熒光蛋白轉基因克隆豬。

（1）基因表達載體含有綠色熒光蛋白基因（目的基因），啟動子、終止子和標記基因，其中啟動子是RNA聚合識別和結合的部位，啟動轉錄；由于終止密碼在mRNA上，所以其本質是RNA。

（2）目的基因（reAnti基因）是否已重組到豬胎兒成纖維細胞的染色體上，可用DNA分子雜交技術進行檢測。

（3）動物細胞培養時，需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動物組織，使動物細胞分散成單個細胞．動物細胞培養時要放入到95%的空氣（保證細胞代謝）和5%CO2（調節培養液的PH）培養箱中。

（4）過程④表示通過顯微操作法吸出卵母細胞中的細胞核，微型吸管除了將細胞核吸除外，往往還要將極體一并吸出。

（5）綠色熒光蛋白轉基因克隆豬的培育過程涉及到的現代生物技術有動物細胞培養、胚胎移植、胚胎細胞核移植等。