Question

【題目】我國飲用水衛生標準規定每毫升水樣中細菌總數不得大于100個，大腸桿菌不得檢出。某興趣小組為測定本地自來水中的細菌總數和是否有大腸桿菌，進行了如下實驗：

①分別配制營養瓊脂培養基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCI、瓊脂、H20）和伊紅美藍培養基（成分：蛋白胨、NaCl、瓊脂、乳糖、伊紅、美藍、H2O），滅菌。

②取水樣。

③先測定甲項指標：用滅菌吸管吸取ImL水樣，涂布到營養瓊脂培養基中；置于37 ℃培養24h后進行菌落計數。另設一個不加水樣的空白對照組。

④用濾膜法測定乙項指標，裝置和操作如下圖。

回答下列問題：

(1)步驟②取水樣前應先將自來水龍頭用火焰灼燒3min，目的是_____。

(2)步驟③測定的指標甲是__。水樣涂布前無需稀釋，理由是____。

(3)步驟④測定乙項指標，主要觀察濾膜上是否會出現 ___色菌落。配制伊紅美藍培養基時，先用蛋白胨、NaCl、瓊脂配制基礎培養基，在l00kPa、121℃條件下滅菌后，冷卻至60。C左右，再加入經70kPa、115℃條件下滅菌的乳糖、伊紅、美藍水溶液，后者滅菌條件不同的原因是____。

(4)興趣小組認為合格的自來水中細菌數量很少，擔心檢測不到，因而將取得的水樣先加入到無瓊脂的營養培養液中培養一段時間后，再稀釋涂布平板計數。這樣操作獲得的數據___ （填“可信”或“不可信”）．理由是____。

Answer 1

【答案】滅菌 細菌總數 自來水中細菌數量很少 紫黑 溶液中的乳糖高溫下會破壞 不可信 細菌會在營養培養液中大量繁殖，其數量不能真實反映水樣中原有的數量

【解析】

本實驗應用到瓊脂，是固體培養基，伊紅美藍培養基是一種鑒別培養基，大腸桿菌在伊紅美藍培養基上可呈現深紫色并帶有金屬光澤。題中指標甲是細菌總數，指標乙是大腸桿菌數。

（1）實驗過程要進行嚴格的滅菌，水龍頭用火焰灼燒3min，目的就是滅菌。

（2）實驗過程首先要測定細菌的總數，再測定大腸桿菌數，因為自來水中細菌數量很少，所以水樣涂布前無需稀釋。

（3）指標乙是大腸桿菌，大腸桿菌在伊紅美藍培養基上會呈現紫黑色并帶有金屬光澤。后者滅菌條件比前者所需要的溫度及壓強都低，是因為后者操作過程加入了乳糖，溶液中的乳糖高溫下會破壞。

（4）若將水樣先加入到無瓊脂的營養培養液中培養一段時間后，則原有水樣中的細菌就會在培養液中繁殖，稀釋涂布平板計數得到的數量不能真實反映水樣中原有的數量，因此這樣操作獲得的數據是不可信的。