Question

【題目】回答下列（一）（二）小題：

（一）柑橘汁在國內外市場上是最受人們歡迎的飲料之一。其大致的生產工藝流程如下：柑橘→選果與洗凈→榨汁→過濾→果汁的調和→脫油和脫氣→加熱殺菌→裝填和冷卻。

（1）為提高柑橘的出汁率，榨汁時一般采用以下兩種處理方式：一是加________處理，分解果肉組織中的果膠物質，提高出汁率；二是__________處理，使細胞原生質中的蛋白質凝固，改變了細胞的半透性，從而提高出汁率。

（2）果汁中含有3%～5%的果肉漿能給予果汁良好的色澤和濁度，但過量會使果汁粘稠化。檢測柑橘汁中果肉漿含量是否合格，可采用比濁法，需要先繪制果肉漿含量與光密度值關系的______________，再通過測定樣品柑橘汁的______________進行計算。

（3）工業生產中的果汁在裝填之前需殺菌處理。柑橘的果汁pH一般都較低，因此殺菌時主要以______為殺菌對象。在微生物的分離、計數過程中，常采用_____________法接種，計數過程中統計的菌落數往往比活菌的實際數目少，這是因為____________。

（二）從西非熱帶植物果實中提取的甜味蛋白質Brazzein是一種高甜度、低熱值的新型非糖甜味劑。但是由于受到產地種植的限制等，難以實現Brazzein的大量生產。近幾年人們引入生物工程方法獲得甜味蛋白。如圖是科學家培育能生產甜味蛋白質Brazzein乳腺生物反應器的過程，請回答相關問題：

（1）甜味蛋白質Brazzein基因，可采用PCR技術進行大量擴增，但前提是______________。過程①可采用動物病毒轉染法，利用攜帶目的基因的病毒感染胚胎干細胞，實現對胚胎干細胞的__________。

（2）過程③通常從雌性小鼠的_______________中獲取囊胚。過程④是將胚胎干細胞顯微注射到小鼠的囊胚腔內形成嵌合體囊胚，將不同來源的基因轉移、組合到嵌合體中，利用這一種方法可以解決________________的困難。

（3）過程⑤中要對受體小鼠進行_____________處理，得到的嵌合體小鼠的毛色為___________________。

（4）鑒定嵌合體小鼠是否成功表達甜味蛋白質Brazzein，可以利用_____________原理對小鼠乳汁中的特異性蛋白進行檢測。

Answer 1

【答案】果膠酶 加熱 標準曲線 光密度值（OD值） 霉菌 稀釋涂布 當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落 甜味蛋白質Brazzein基因序列已知 轉化 子宮角或輸卵管 遠緣雜交不親和 同期發情 黑白相間 抗原抗體反應

【解析】

果膠酶能夠分解果膠，瓦解植物的細胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，也是果汁變得澄清；比濁法測定柑橘汁中果肉漿含量的相關操作可參考泡菜制作過程中亞硝酸鹽的測定；微生物接種常用的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中用稀釋涂布法可以得到單菌落，因而可以對微生物計數；培育能生產甜味蛋白質Brazzein乳腺生物反應器的過程中，甜味蛋白質Brazzein基因是目的基因，圖中①表示將目的基因導入受體細胞，早期發育的胚胎分為卵裂期、桑椹胚、囊胚、原腸胚等階段，③獲取小鼠囊胚可從生殖器官中（輸卵管和子宮角）取出；⑤表示將嵌合體囊胚移植到受體內，著床發育形成個體并表達的過程。

（一）（1）為提高柑橘的出汁率，榨汁時一般采用以下兩種處理方式：一是加果膠酶處理，二是加熱處理，兩者都能提高出汁率。

（2）果汁中含有3%～5%的果肉漿能給予果汁良好的色澤和濁度，但過量會使果汁粘稠化。檢測柑橘汁中果肉漿含量是否合格，可采用比濁法，需要先繪制果肉漿含量與光密度值關系的標準曲線，再通過測定樣品柑橘汁的光密度值進行計算。

（3）柑橘的果汁pH一般都較低，而細菌通常要求在中性偏堿的環境中生長，霉菌要求在中性偏酸的環境中生長，因此工業生產中的果汁在裝填之前需殺菌處理，此殺菌時主要以霉菌為殺菌對象。微生物的接種、純化可以用平板劃線法和稀釋涂布平板法，計數時應用稀釋涂布法接種，用該方法接種后，培養基上當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此計數過程中統計的菌落數往往比活菌的實際數目少。

（二）（1）甜味蛋白質Brazzein基因，可采用PCR技術進行大量擴增，但前提是甜味蛋白質Brazzein基因序列已知。過程①可采用動物病毒轉染法，利用攜帶目的基因的病毒感染胚胎干細胞，實現對胚胎干細胞的轉化。

（2）過程③通常從雌性小鼠的子宮角或輸卵管中獲取囊胚。過程④是將胚胎干細胞顯微注射到小鼠的囊胚腔內形成嵌合體囊胚，將不同來源的基因轉移、組合到嵌合體中，利用這一種方法可以解決遠緣雜交不親和的困難。

（3）過程⑤將囊胚移植前，要對受體小鼠進行同期發情處理，再移植到受體小鼠的子宮內；甜味蛋白質Brazzein基因來自白色小鼠胚胎干細胞，囊胚來自黑色小鼠，形成的嵌合體囊胚發育得到的嵌合體小鼠的毛色理論上為黑白相間。

（4）鑒定嵌合體小鼠是否成功表達甜味蛋白質Brazzein，可以利用抗原-抗體反應原理對小鼠乳汁中的特異性蛋白進行檢測。