Question

【題目】下圖是制備抗埃博拉病毒VP40蛋白的單克隆抗體的過程

(1)過程①中選用EcoRⅠ和XhoⅠ兩種限制酶切割的優點是_________，此外還要用到________酶。

(2)過程②中首先需要用Ca2＋處理大腸桿菌，使其處于感受態，VP40基因進入大腸桿菌后維持穩定并表達的過程稱為______。

(3)與植物原生質體融合相比，過程④特有的方法是用________處理。通常在選擇培養基中需加入抗生素，目的是________________________。選擇培養基上存活的雜交瘤細胞產生的抗體________(填“是”或“不是”)單克隆抗體。

(4)圖示過程應用的生物技術有______________________________________

Answer 1

【答案】防止自身環化 DNA連接 轉化 滅活的病毒 防止培養過程中的污染 不是 基因工程、動物細胞培養、動物細胞融合

【解析】

制備抗埃博拉病毒VP40蛋白的單克隆抗體的過程，①是目的基因與運載體結合，②是將目的基因導入受體細胞，給老鼠注射特定的抗原蛋白：VP40蛋白引起小鼠的特異性免疫，產生特定B淋巴細胞，④過程是動物細胞融合過程，據此答題即可。

（1）過程①中選用EcoRⅠ和XhoⅠ兩種限制酶切割可以使目的基因的兩端獲得不同的粘性末端，所以這樣處理的優點是防止目的基因自身環化，此外目的基因與運載體結合還需DNA連接酶。
（2）過程②是將目的基因導入受體細胞，此過程首先需要用Ca2+處理大腸桿菌，使其處于感受態，VP40基因進入大腸桿菌后維持穩定并表達的過程稱為轉化。
（3）與植物原生質體融合相比原理基本相同，植物原生質體融合常用物理方法和化學方法，動物細胞融合特有的方法是用滅活的病毒處理，通常在選擇培養基中需加入抗生素，目的是防止培養過程中的污染．選擇培養基上存活的雜交瘤細胞，還需要進行克隆化培養和抗體檢測，經過多次篩選才可以獲得能產生特定抗體的雜交瘤細胞，所以選擇培養基上存活的雜交瘤細胞產生的抗體不是單克隆抗體。
（4）圖示過程應用的生物技術有：基因工程、動物細胞培養、動物細胞融合。