Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題：

(一)某科研團隊利用植物細胞工程技術，把基因序列已知的抗除草劑（Bar）基因導入原生質體獲得抗除草劑大豆。請回答下列相關問題：

(1)對于已獲得的Bar基因可以用 技術進行擴增。圖中的a過程通常使用相同的 酶和DNA連接酶，使目的基因與載體連接形成重組DNA。

(2)在b過程中，獲得原生質體除了需要纖維素酶和果膠酶，還需要用到的試劑是 。

(3)成功導入重組DNA的原生質體經脫分化形成Ⅰ ,進而生長發育成植株。

下列不屬于Ⅰ細胞應具有的特征是 。

A.薄壁細胞 B.細胞質豐富 C.液泡小 D.細胞核小

(4)若要判斷轉基因抗除草劑大豆是否成功，比較簡便的檢測方法是 。

(二)下圖是“分離以尿素為氮源的微生物”實驗的基本流程，請回答下列問題:

(5)該實驗培養基不能含有 。

A.尿素 B.氯化鈉 C.葡萄糖 D.瓊脂

(6)尿素溶液可用 使之無菌。若要檢查B過程滅菌是否徹底，可以采用的方法是 。

(7)圖中步驟C為 。相對于劃線分離法，過程D涂布分離法的優點是 。

(8)如果菌落周圍出現 色環帶，說明該菌落能分泌脲酶。

Answer 1

【答案】（一）

（1）PCR 限制性核酸內切

（2）（較高濃度的）甘露醇

（3）愈傷組織 D

（4）用一定濃度的除草劑噴灑，觀察轉基因大豆的生長情況

（二）

（5）D

（6）G6玻璃漏斗過濾 將空白培養基放在適宜溫度下培養一段時間，觀察有無菌落出現

（7）倒平板 單菌落更易分開

（8）紅

【解析】（一）(1) 可通過PCR技術進行體外擴增，獲得大量Bar基因。a過程為構建基因表達載體，需要相同的限制性核酸內切和DNA連接酶，使目的基因與載體連接形成重組DNA。

（2）在獲得植物原生質體時，需在0.5～0.6mol/L的甘露醇溶液環境（較高滲透壓）下用纖維素酶和果膠酶混合液處理實驗材料，將細胞壁消化除去，獲得球形的原生質體。

（3）成功導入重組DNA的原生質體經脫分化形成愈傷組織，再經過再分化，分化出芽和根，進而生長發育成植株。

（4）Ⅰ細胞為愈傷組織，該類單細胞具有細胞質豐富、液泡小、細胞核大等特征，故D錯誤。

（二）（5）分離以尿素為氮源的微生物，需要液體培養基，不需要瓊脂，D錯誤。

（6）尿素溶液可用G6玻璃漏斗過濾使之無菌，將空白培養基放在適宜溫度下培養一段時間，觀察有無菌落出現來檢查B過程滅菌是否徹底。

（7）圖中步驟C為倒平板，過程D為涂布分離法，均勻的涂布在培養基上，使得單菌落更易分開。

（8）鑒定尿素分解菌常采用酚紅指示劑染色，使指示劑變紅色，如果菌落周圍出現紅色環帶，說明該菌落能分泌脲酶。