Question

【題目】石油污染土壤的微生物修復技術得到廣泛研究和應用。回答相關問題：

（1）采用向多孔結構的污染土壤中通入空氣可有效的促進石油的分解，原因是_____________________。石油主要含有碳和氫屬于____________，還需加入適量____________進而加快石油污染物的降解。

（2）如圖是純化分解石油的單一假單胞菌的一種方法。該培養基在滅菌前需要____________，進行倒平板的操作時對環境的要求是________________________。

（3）圖中依次進行四區劃線，四區的面積要求為C＜D＜E＜F，F區面積最大有利于獲得____________。注意F區劃線不要與________________________（填字母）區相連。

（4）如果需要對微生物進行計數則需要用稀釋涂布平板法。稀釋樣品液至一定范圍的目的是____________；這種方法統計的明顯不足之處是____________。

Answer 1

【答案】 土壤中含有許多分解石油的微生物，這些微生物是需氧生物（或進行有氧呼吸） 碳源 氮源和無機鹽 調節pH 在酒精燈火焰旁進行操作 單個菌落 C（或C、D） 保證獲得菌落數為30－300之間，適于平板計數 菌落數比實際活菌數少

【解析】培養基一般含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、生長因子以及氧氣的要求，石油主要含有碳和氫，相當于碳源。制備培養基的步驟是：計算→稱量→溶化→調節pH→分裝→滅菌→倒平板，為避免周圍環境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行。平板劃線操作時要求每次劃線都從上次劃線末端開始，且每次劃線前都要對接種環灼燒滅菌，最后一次劃的線不能與第一次劃的線相交。稀釋涂布平板法在實際操作中通常選用一定稀釋范圍的樣液進行培養，對菌落數為30-300的平板進行計數，由于兩個或多個細菌細胞連在一起時，平板上只能觀察到一個菌落，因此采用稀釋涂布平板法計數的結果偏小。

（1）向多孔結構的污染土壤中通入空氣，可促進微生物的有氧呼吸；石油主要含有碳和氫，相當于培養基中的碳源，此外，為了促進微生物的生長繁殖，加快石油污染物的降解，還需加入適量氮源和無機鹽。

（2）培養基在滅菌前需要調節pH，進行倒平板的操作時應在酒精燈火焰附近進行，避免周圍環境中微生物的污染。

（3）最后劃線的F區域最易獲得單菌落，且要求F區劃線不能與C區重合。

（4）稀釋涂布平板法統計時只計數菌落數為30-300的平板，因此需要將樣液稀釋到一定范圍；兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只有一個菌落，因此，稀釋涂布平板法統計的菌落數往往比活菌的實際數目低。