Question

【題目】動物細胞培養(yǎng)技術是動物細胞工程的基礎，在動物細胞工程的其他技術中都得廣泛應用（如圖）．下面是與動物細胞工程相關的問題，請分析回答：
（1）在進行動物細胞培養(yǎng)時，首先要將動物組織剪碎，然后用處理，以分散成單個細胞，制成細胞懸液．
（2）動物細胞培養(yǎng)時，要保證細胞必需的營養(yǎng)、適宜的溫度和pH條件，還要提供無菌、無毒和適宜的氣體環(huán)境．為達到無菌、無毒的環(huán)境條件，除了要對培養(yǎng)液和培養(yǎng)器具進行消毒外，還要① ， ② ． 氣體環(huán)境中CO2的作用是 ．
（3）應用于核移植的供體細胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細胞，原因是 ．
（4）如圖表示單克隆抗體的制備過程，給小鼠注射特定抗原后產(chǎn)生的、與骨髓瘤細胞融合的細胞是 ． 在細胞融合的過程中，常用的化學誘導劑是；篩選出的雜交瘤細胞所表現(xiàn)出的優(yōu)良性狀是 ．

Answer 1

【答案】
（1）胰蛋白酶（膠原蛋白酶）
（2）在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液；維持培養(yǎng)液的PH
（3）10代以后的細胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變（或保證供體細胞正常的遺傳基礎）
（4）B淋巴細胞（漿細胞）；聚乙二醇（PEG）；可在體外條件下，無限增殖，又能分泌單一抗體
【解析】解：（1）在進行動物細胞培養(yǎng)時，動物組織需要用胰蛋白酶（膠原蛋白酶）處理分散成單個細胞，制成細胞懸液．（2）動物細胞培養(yǎng)時，要保證無菌、無毒的環(huán)境條件，可采用對培養(yǎng)液和培養(yǎng)器具進行消毒、在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素、定期更換培養(yǎng)液．氣體環(huán)境中CO2的作用是維持培養(yǎng)液的PH．（3）10代以后的細胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變（或保證供體細胞正常的遺傳基礎），因此在核移植技術中供體細胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細胞．（4）在單克隆抗體的制備過程中，給小鼠注射特定抗原后，產(chǎn)生的具有免疫能力的B淋巴細胞（漿細胞），常用的化學誘導劑是聚乙二醇（PEG）誘導具有免疫能力的B淋巴細胞（漿細胞）與骨髓瘤細胞融合．篩選出的雜交瘤細胞具有在體外條件下無限增殖，又能分泌單一抗體的優(yōu)良性狀． 所以答案是：（1）胰蛋白酶（膠原蛋白酶）（2）①在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素　②定期更換培養(yǎng)液、維持培養(yǎng)液的PH（3）10代以后的細胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變（或保證供體細胞正常的遺傳基礎）（4）B淋巴細胞（漿細胞）　聚乙二醇（PEG）可在體外條件下，無限增殖，又能分泌單一抗體
【考點精析】關于本題考查的動物細胞與組織培養(yǎng)過程和單克隆抗體的制備，需要了解取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)；對免疫小鼠注射特定的抗原蛋白；提取B淋巴細胞；同時用動物細胞培養(yǎng)的方法培養(yǎng)骨髓瘤細胞并提取；促使它們細胞融合；在特定的選擇培養(yǎng)基上篩選出融合的雜種細胞；然后對它進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；最后將雜交瘤細胞在體外做大規(guī)模培養(yǎng)或注射入小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中可得到大量的單克隆抗體才能得出正確答案．