Question

【題目】某實(shí)驗(yàn)小組利用下圖所示質(zhì)粒和目的基因來構(gòu)建基因表達(dá)載體，將目的基因?qū)�入大腸桿菌細(xì)胞并表達(dá)。下列敘述正確的是（ ）

A.圖中的質(zhì)粒用酶A切割后，會(huì)產(chǎn)生8個(gè)游離的磷酸基團(tuán)

B.在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可用酶A和酶C切割質(zhì)粒和目的基因

C.成功導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌可在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中生長

D.若用酶B和酶C切割，可以避免質(zhì)粒的自身環(huán)化

Answer 1

【答案】D

【解析】

“分子手術(shù)刀”--限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）

（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的；

（2）功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性；

（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。

由于酶A和C都在質(zhì)粒標(biāo)記基因的位置，所以需要用酶B和C同時(shí)切割質(zhì)粒和目的基因。

A、質(zhì)粒中含有2個(gè)酶A的酶切位點(diǎn)，所以切割后會(huì)產(chǎn)生4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，A錯(cuò)誤；

B、如果用酶A和C同時(shí)切割質(zhì)粒，會(huì)破壞質(zhì)粒的標(biāo)記基因，B錯(cuò)誤；

C、根據(jù)B項(xiàng)分析，需要用酶B和C切割質(zhì)粒和目的基因，導(dǎo)致四環(huán)素抗性基因被破壞，所以不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中生長，C錯(cuò)誤；

D、若用酶B和酶C切割，產(chǎn)生不同的黏性末端，避免質(zhì)粒自身環(huán)化，D正確。

故選D。