Question

【題目】下圖是利用基因工程技術生產人胰島素的操作過程示意圖，請據圖作答：

（1）過程①不能利用人的肝臟細胞來完成，原因是_______________。

（2）過程②稱為________，可以用____________(試劑）檢驗該過程產物的化學本質。

（3）在體外得到大量DNA的PCR技術，與體內DNA復制的不同之處主要表現在溫度環境的要求不同。PCR中首先用95℃高溫處理，目的是_________，而這一過程在細胞內是通過___________實現的。PCR過程中的引物實質是_________。

（4）⑦過程要用到____________酶從而形成重組分子，為使⑧過程更易進行，應用_________處理大腸桿菌。

Answer 1

【答案】 肝臟細胞中的胰島素基因不表達（轉錄） 反轉錄(逆轉錄） 二苯胺 使DNA解旋（兩條鏈解開螺旋） 解旋酶 單鏈DNA DNA連接 Ca2+

【解析】試題分析：圖中①表示從胰島B細胞中獲取胰島素mRNA的過程；②為逆轉錄過程，A為胰島素基因；③④⑤表示目的基因的擴增過程；⑥表示用限制酶切割運載體形成黏性末端的過程；⑦表示基因表達載體的構建過程；⑧表示將目的基因導入受體細胞的過程；⑨表示目的基因隨著受體細胞的增殖和擴增；⑩是從培養液中獲取胰島素的過程。

（1）基因是選擇性表達的，肝臟細胞中的胰島素基因不表達，所以過程①不能利用人的肝臟細胞來完成。

（2）過程②表示逆轉錄，產物是DNA，DNA可以用二苯胺水浴加熱，進行鑒定。

（3）PCR中首先用95℃高溫處理，目的是使DNA解旋，而這一過程在細胞內是通過解旋酶實現的。PCR過程中的引物實質是單鏈DNA。

（4）⑦表示基因表達載體的構建過程，需要DNA連接酶將目的基因和質粒連接起來。將目的基因導入大腸桿菌前，需要用鈣離子處理大腸桿菌。