Question

【題目】從自然界篩選嗜鹽菌（好氧型）的一般步驟是：采集菌樣→富集培養→純種分離→計數及性能測定。

（1）培養嗜鹽菌的菌樣往往從高鹽環境采集，說明了在自然界尋找各種目的菌株時，遵循的共同原則是根據目的菌株_________________________。

（2）富集培養指創設僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環境條件，使其在群落中的數量大大增加，從而分離出所需微生物的培養方法。對嗜鹽產淀粉酶微生物的富集培養應選擇以________為唯一碳源的培養基，并在高鹽條件下培養。在富集培養過程中，需將錐形瓶放在搖床上振蕩，一方面使菌株與培養液充分接觸，提高營養物質的利用率；另一方面能_____________，從而更有利于該微生物的生長繁殖。

（3）在純化嗜鹽菌時，實驗操作如圖，則采用的接種方法是___________，根據該圖可判斷，正確完成圖示的實驗操作，接種環要求灼燒_______________次。

（4）可采用稀釋涂布平板法對嗜鹽菌進行計數，其原理是_____________________，統計平板上的菌落數，即可推測出樣品活菌數；計數結果往往比實際活菌數低，是因為_________________________。

Answer 1

【答案】對生存環境的要求，到相應的環境中去尋找 淀粉 增加培養液中的溶氧量 平板劃線法 6 樣品稀釋度足夠高時，稀釋液中的一個活菌可在平板上長出一個單菌落，稀釋液體積和稀釋倍數已知（涂布稀釋液時） 如有兩個或多個細胞連在一起，（經過培養）平板上觀察到的只是一個菌落

【解析】

選擇培養基是根據不同微生物在代謝過程中所需要的營養物質和環境不同而配制的。微生物常見的接種的方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。每毫升樣品中的細菌數=（平板的平均菌落數÷涂布的體積）×稀釋的倍數。

（1）自然界中目的菌株的篩選的依據是根據目的菌株對生存環境的要求，到相應的環境中去尋找。

（2）對嗜鹽產淀粉酶微生物的富集培養應選擇以淀粉為唯一碳源的培養基，并在高鹽條件下培養。在富集培養過程中，需將錐形瓶放在搖床上振蕩以增加培養液中的溶氧量，同時讓菌株充分接觸營養物質，提高營養物質利用率。

（3）圖中操作是在瓊脂固體培養基表面連續劃線，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基表面，在數次劃線之后培養，因此采用的接種方法是平板劃線法。根據該圖可知劃線順序為①→②→③→④→⑤，在每次劃線前和劃線后都要將接種環放在火焰上灼燒滅菌，因此正確完成圖示的實驗操作，接種環要灼燒6次。

（4）稀釋涂布平板法對嗜鹽菌進行計數，其原理是樣品稀釋度足夠高時，稀釋液中的一個活菌可在平板上長出一個單菌落，稀釋液體積和稀釋倍數已知，統計平板上的菌落數，即可推測出樣品活菌數。統計平板上的菌落數時，如有兩個或多個細胞連在一起，經過培養平板上觀察到的只是一個菌落，因此計算結果往往比實際活菌數低。