Question

【題目】泡菜的制作離不開乳酸菌，但酵母菌對泡菜的風味和品質也有著重要影響，為研究泡菜發酵過程中酵母菌種群數量的動態變化和pH變化，科研人員選用3份泡菜“老鹽水”Y1、Y2、Y3和新鮮蘿卜進行了以下實驗。請完善下列實驗過程并分析回答：

(1)制作泡菜

______________________

(2)酵母菌的分離、純化及鑒定

無菌操作下每天取泡菜鹽水25mL，加入________mL無菌水中，將樣品稀釋十倍，再依次稀釋成102、103、104、105倍稀釋液，分別接種涂布，置于28℃恒溫培養箱中培養24h，觀察菌落特征，并選取培養基上的________用于DNA分子鑒定。

(3)菌落計數和鹽水中的pH值測定

選取便于計數的培養基對不同種酵母菌的菌落分別計數，用此方法計數和直接在顯微鏡下計數菌體相比，得到的數值往往偏小，原因有________，________。同時，每天用精密pH計測定鹽水中的pH值。

(4)結果分析

實驗持續15天，部分實驗結果如下：

①發酵后期，膜璞畢赤酵母數量減少，甚至消失，從種間競爭的角度分析原因可能是__________________________________________________。

②采用Y1老鹽水泡制蘿卜10d后，泡菜表面出現白膜(俗稱“生花”)，這可能與Y1發酵液中后期________較多有關，其存在時間較長的原因可能是__________________________________________________。

Answer 1

【答案】密封 225 單菌落 此方法只計算活菌數，直接在顯微鏡下計數菌體活菌和死菌全部算入 當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的僅是一個菌落 乳酸菌大量產生乳酸，降低pH值，逐漸抑制酵母菌而成為優勢菌群 膜璞畢赤酵母(或酵母菌) 在發酵過程中，Y1發酵液pH值下降緩慢

【解析】

泡菜制作流程如下

（1）密封發酵：在壇蓋邊沿的水槽中注滿水，以保證壇內乳酸菌所需的無氧環境。

（2）假設加入xml水，25/(25+x)=1/10，得x=225，進行DNA分子鑒定是應選單菌落，單菌落是由一個細胞發育而來的子細胞群體。

（3）能用于計數的微生物接種方法是稀釋涂布平板法，用此方法計數和直接在顯微鏡下計數菌體相比，得到的數值往往偏小，原因：此方法只計算活菌數，直接在顯微鏡下計數菌體活菌和死菌全部算入，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的僅是一個菌落。

（4）①乳酸菌進行無氧呼吸大量產生乳酸，降低pH值，逐漸抑制酵母菌而成為優勢菌群。②白膜(俗稱“生花”)是 膜璞畢赤酵母(或酵母菌)在液面大量繁殖形成的，分析表格可知在發酵過程中，Y1 與兩外兩組相比較發酵液pH值下降緩慢，這是酵母菌存在時期較長的原因。