Question

３５. 回答有關“基因工程”方面的問題（共10分）

I．請分析下面一項專利：

申請專利號	03109739.1	專利申請日	2003.04.14
名稱	利用轉基因番茄生產胰島素的方法	公開號	1458161
公開日	2003.11.26[	申請（專利權）	林忠平
地址	北京市北京大學生命科學學院	發明（設計）人	林忠平、倪挻、陳溪、胡雷
專利摘要	本發明利用轉基因番茄作為生物反應器生產人胰島素。所用的人胰島素基因是依據植物偏愛密碼子的原則來設計所含的密碼子，通過人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在C端加上KDEL的內質網滯留序列，避免胰島素在植物細胞中的降解。將該基因置于CaMV35S啟動子和果實專一性啟動子2A12的驅動之下通過農桿菌介導的方法轉入番茄中，在番茄的果實中表達人胰島素。

（１）此基因工程中，目的基因是               。檢測受體細胞中是否存在目的基因，方法有               。這項專利所依據的遺傳學原理主要是                  。

（２）重組時，在C端加上KDEL的內質網滯留序列的目的是                     。

（３）為了防止目的基因通過花粉轉移到其他植物，應該把目的基因導入受體細胞的

                 中。

II．下圖描述的是上述利用轉基因番茄獲得產品的過程。已知限制酶a的識別序列和切點是—G^↓GATCC— ，限制酶b的識別序列和切點是—^↓GATC—。

 

 

 

                                      

（１）圖中①的過程是______過程。

（２）圖中②的過程，在基因工程中的步驟是________________。

（３）目的基因與農桿菌質粒重組過程中，對符合設計要求的質粒進行酶切。請畫出農桿菌質粒被限制酶a切割后所形成的兩個DNA片段末端堿基序列______________。

（４）目的基因導入細胞后要成功表達，需經歷______和______兩個過程。

Answer 1

（1）人胰島素基因；受體細胞中是否具有某些標記基因；堿基互補配對

（2）使合成的胰島素在內質網中保存，以免被降解  （3）葉綠體或線粒體

（4）逆轉錄   （5）將重組DNA分子（重組質粒）導入受體細胞

（6）- G          GATCC -

      |       和       |

    - CCTAC          G -

（7）轉錄；翻譯