Question

【題目】表格是篩選異養型細菌的培養基配方；圖是采用純化微生物培養的一種接種方法接種后培養的效果圖。

KH2PO4	1．4g
Na2HPO4	2．1g
MgSO4·7H2O	0．2g
FeCl3	0．1g
X	1g
維生素	微量
瓊脂	15g
將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到100mL

（1）若用該培養基分離土壤中有分解苯胺能力的異養型細菌，此培養基中的成分X除了為目的菌提供能源外，還能提供_______，該培養基從物理性質看屬于_______培養基。中學實驗室中對培養基進行滅菌的常用方法是_______。

（2）如上圖是采用純化微生物培養的一種接種方法接種后培養的效果圖，該接種方法是__________，出現上圖結果可能的操作失誤是____________________。若該小組采取正確的操作方法，過程和結果為：將1mL樣品稀釋100倍，在3個平板上分別接種0．1mL稀釋液；經適當培養后，3個平板上的菌落數分別為56、58和57。據此可得出每升樣品中的活菌數為_______個。

（3）若用該培養基篩選分解纖維素的微生物，常用到剛果紅染色法，剛果紅染色法的原理是：________________________________________________________。

Answer 1

【答案】碳源和氮源 固體 高壓蒸汽滅菌法 稀釋涂布平板法 涂布不均勻 5.7×107個/L 剛果紅能和纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，紅色復合物不能形成，培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌

【解析】

據圖表分析：1、圖中的接種方法是稀釋涂布平板法；

2、表中所給的培養基配方是細菌的固體培養基配方，表中已知成分中缺少碳源和氮源，必須有X物質提供．

3、微生物培養基制作完成后，應該先調整pH，再滅菌，對培養基的滅菌常用高壓蒸汽滅菌法．常用的在固體培養基上的接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法，尿素分解菌可以用酚紅指示劑檢測，纖維素分解菌可以用剛果紅染色法鑒定。

（1）根據培養基的配方可以看出，所給的物質中不能為微生物提供碳源和氮源，因此微生物生長所需要的碳源和氮源，可以由X提供；

該培養基中加入了瓊脂作為凝固劑，因此從物理性質看屬于固體培養基，常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。

（2）圖中看出在培養皿上形成了單個菌落，所以采用的方法是稀釋涂布平板法，圖中的操作錯誤是涂布不均勻。根據細菌數目的計算公式：，3個平板上的菌落數分別為56、58和57，所以平均值為57，每升菌液中細菌個數=個/L。

（3）纖維素分解酶的鑒定常用剛果紅染色法，其原理是剛果紅能和纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，紅色復合物不能形成，培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。