Question

【題目】研究發(fā)現(xiàn)，H5亞型禽流感能突破種間屏障感染人類．科研人員針對人流感病毒H3以及禽流感病毒H5進行了相關研究．回答下列問題：
（1）獲得禽流感病毒和人流感病毒的RNA，經(jīng)的作用合成DNA．PCR擴增合成的兩種病毒的DNA片段時，所需的關鍵酶是 ．
（2）研究人員利用p質粒構建p﹣H5/H3共表達的重組質粒（如圖），設計思路是：先將H5基因整合到p質粒（僅含有NheⅠ和XhoⅠ酶切位點）上，再將H3基因插入，獲得重組質粒．為達到實驗目的，需要在目的基因兩端引入酶切位點，在H5基因兩端需要引入酶切位點．
（3）重組質粒p﹣H5/H3中的啟動子是識別和結合的部位，能驅動基因轉錄出mRNA．除圖中所示的組成外，重組質粒p﹣H5/H3中還應有等．
（4）研究人員將重組質粒p﹣H5/H3直接導入人或動物體內，讓其在宿主細胞中表達出 ， 不斷進行體液免疫和細胞免疫，達到預防的目的．上述研究表明，通過將 ， 可以實現(xiàn)一種基因疫苗預防多種疾病的目的．

Answer 1

【答案】
（1）逆轉錄酶；熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）
（2）NheⅠ、ClaⅠ、XhoⅠ
（3）RNA聚合酶；終止子、標記基因
（4）抗原蛋白；多個抗原基因插入同一個質粒中
【解析】解：（1）由RNA合成DNA需要逆轉錄酶．PCR技術中所需的關鍵酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶），加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始合成互補鏈．（2）分析圖解可知，步驟中先將H5基因整合到p質粒上，該質粒上僅含有NheⅠ和XhoⅠ酶切位點，即用NheⅠ和XhoⅠ兩種酶切割目的基因構建重組質粒；而將H3基因插入，獲得重組質粒需要H5基因右端有ClaⅠ酶，因此需要在H5基因兩端需要引入NheⅠ、ClaⅠ、XhoⅠ酶切位點．（3）啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位，能驅動基因轉錄出mRNA．重組質粒由啟動子、終止子、目的基因和標記基因組成．（4）將重組質粒p﹣H5/H3直接導入人或動物體內，經(jīng)過基因表達能夠合成抗原蛋白，用于體液免疫和細胞免疫，達到預防的目的．通過將 多個抗原基因插入同一個質粒中，可以實現(xiàn)一種基因疫苗預防多種疾病的目的．
【考點精析】解答此題的關鍵在于理解基因工程的原理及技術的相關知識，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術．