Question

【題目】某生物研究小組為了驗證酵母菌在無氧或缺氧條件下才能產生酒精，他們依據“酒精具有還原性，可使酸性重鉻酸鉀變為灰綠色”的原理進行實驗，裝置如下圖。分析回答：

(1)A裝置中滴加石蠟油的目的是________________________。

(2)A、D裝置中“注射器”的作用是______________________。

(3)實驗10min后，從A、D兩裝置中各抽取2mL溶液，加入酸性重鉻酸鉀溶液后搖勻，均出現了灰綠色。甲、乙兩同學對于D裝置出現灰綠色提出了不同的解釋：甲同學認為D裝置也產生了酒精；乙同學認為是由于D裝置中的葡萄糖未消耗完導致的。

①甲同學解釋的依據是____________。

②乙同學解釋的依據是__________，若設計實驗判斷此依據是否正確，其基本思路是 ______。

③若實驗結果是由乙同學分析的原因導致，則實驗操作應如何改進？___。

(4)在培養后期對培養液稀釋100倍后，用血球計數板（規格為1mm×1mm×0.1mm，25×16式）計數，顯微觀察時，甲同學在調焦清楚后，只看到血球計數板的橫線而看不到豎線，此時應該_____________________________，后來統計其中的五個中方格共有酵母菌120個。同時興趣小組的同學另取一定量培養液用臺盼藍對酵母菌進行染色，多次鏡檢獲得結果如下：

	第一次	第二次	第三次
未染色酵母菌	20	17	23
藍色酵母菌	4	3	5

則培養液中活酵母菌的密度為________個/毫升。

Answer 1

【答案】隔絕空氣，營造無氧環境便于取等量樣液用于檢測供氧不足或局部缺氧可能導致酵母菌無氧呼吸產生酒精葡萄糖具有還原性，也可能使重鉻酸鉀溶液變灰綠色直接向2mL葡萄糖溶液中加入酸性重鉻酸鉀溶液，觀察顏色變化延長反應時間，等A、D裝置中的葡萄糖消耗完，再抽取溶液進行檢測(調節反光鏡和光圈，）將視野調暗5.0×108

【解析】

裝置A為無氧裝置，加入石蠟油是為了隔絕空氣；裝置C中過氧化氫和二氧化錳反應可產生氧氣，因此D裝置為有氧呼吸裝置，A、D中注射器是為了方便取液檢測。

（1）本實驗目的是驗證酵母菌在無氧或缺氧條件下才能產生酒精，A裝置為無氧呼吸裝置，滴加石蠟油的目的是隔絕空氣，造成無氧的環境。

（2）A、D裝置中“注射器”的作用是便于取等量樣液用于檢測是否產生酒精。

（3）①甲同學解釋的依據是供氧不足或局部缺氧可能導致酵母菌無氧呼吸產生酒精；

②乙同學解釋的依據是葡萄糖具有還原性，也可能使重鉻酸鉀溶液變灰綠色。若設計實驗判斷此依據是否正確，可取2mL葡萄糖溶液，直接向其中加入酸性重鉻酸鉀溶液，觀察顏色是否變化。

③若實驗結果是由乙同學分析的原因導致，即葡萄糖具有還原性導致重鉻酸鉀溶液變灰綠色，則實驗操作時必需保證葡萄糖消耗完，因此，可延長反應時間，等到A、D裝置中的葡萄糖消耗完再抽取溶液進行檢測。

（4）甲同學在調焦清楚后，只看到血細胞計數板的橫向而看不到豎線，此時可將視野調暗。培養后期稀釋100倍后按照五點取樣法計數，血球計數板（規格為1mm×1mm×0.1mm，25×16式）的五個中方格中共有酵母菌120個。已知每個計數室由25個中格組成，容納液體的總體積為0.1mm3，其中5個中格中共有酵母菌120個，該計數室共有120/5×25=600個酵母菌，0.1mm3=1×10-4mL，則1mL樣液中約有酵母菌600×100/（1×10-4）=6×108個酵母菌。興趣小組同學取一定量培養液用臺盼藍對酵母菌進行染色，并取樣多次鏡檢獲得沒有染上色的是活酵母菌，活酵母菌的比例是（20+17+23）/（24+20+28）=60/72，則培養液中活酵母菌的密度為6×108×60/72=5.0×108個/毫升。