Question

【題目】圖1為某種普通質粒的示意圖，質粒上3種限制酶的酶切位點如圖所示（箭頭表示識別序列）。圖2表示制備抗體的兩個途徑的模式圖。

（1）據圖1提供的信息，你推薦最好采用_____酶去切割質粒較為理想。

（2）圖2中 ③④⑤⑥過程中的目的基因是_____。 圖中獲取該目的基因的方法是_____。

（3）圖2中①過程形成的Y細胞稱為_____細胞，過程①的原理_____。

（4）抗體2在人體內引起免疫反應，這個過程屬于_____。

A．細胞免疫 B．人工免疫 C．體液免疫 D．特異性免疫

（5）過程①需要采用的生物技術是_____。通過圖2中①②過程獲得的抗體1屬于_____工程。

A．基因工程 B．細胞工程 C．發酵工程 D．酶工程

（6）下列①～④表示轉基因技術的步驟，其中步驟④是_____；根據基因工程過程請將①﹣④步驟排序以實現獲取抗體2，正確排序_____。

①重組DNA分子導入大腸桿菌細胞

②篩選含目的基因的受體細胞

③人工合成目的基因

④　 　

（7）為了檢測目的基因是否導入大腸桿菌，需要進行篩選。其操作過程如下，請把下列各步填寫完整：

第一步，配制培養基。除下表中的成分外，還必須添加_____。

第二步，菌液用_____法接種在第一步配制的培養基上。

第三步，選擇目標菌落擴大培養。

牛肉膏	0.5g
蛋白胨	1g
NaCl	0.5g
瓊脂	2g
水	200mL

Answer 1

【答案】Pst I V1 基因 化學方法人工合成（逆轉錄法） 雜交瘤細胞 利用了細胞膜的流動性/一定的流動性 C D 細胞融合技術 B 目的基因與運載體的連接 ③④①② 新霉素 稀釋涂布法

【解析】

1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與表達。

2、據圖2分析可知，細胞A表示效應B細胞，細胞Y表示雜交瘤細胞，①過程表示動物細胞融合，②過程動物細胞培養，③過程提取信使RNA，④過程表示逆轉錄，⑤表示基因表達載體的構建，⑥表示導入受體細胞。

（1）切割質粒時要保證目的基因和復制原點不被破壞，因此選擇限制酶Pst I 酶切割較為理想。

（2）由圖可知，③④⑤⑥過程中的目的基因是V1基因。 圖中獲取該目的基因的方法是化學方法人工合成（或逆轉錄法）。

（3）過程①至②抗體的獲取稱為單克隆抗體，其中①是細胞融合過程，Y細胞稱為雜交瘤細胞；細胞融合的原理是細胞膜具有一定的流動性。

（4）抗體是體液免疫過程中產生的，體液免疫屬于特異性免疫。

（5）過程①需要采用細胞融合技術。通過圖2中①②過程獲得的抗體1屬于細胞工程。

（6）基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與表達。因此，步驟④是目的基因與運載體的連接，正確排序③④①②。

（7）用限制酶Pst I 酶切割會破壞氨芐青霉素抗性基因，但沒有破壞新霉素基因，因此配制培養基時，除下表中的成分外，還必須添加新霉素。菌液用稀釋涂布法接種在第一步配制的培養基上