Question

【題目】下圖四種質粒含有E1和E2兩種限制酶的識別位點，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四環素的抗性基因．

（1）基因工程中使用的限制酶，其特點是 ．
（2）將兩端用E1切開的Tcr基因與用E1切開的質粒X﹣1混合連接，連接后獲得的質粒類型有 ． （多選）
①X﹣1 ②X﹣2 ③X﹣3 ④X﹣4
（3）若將上圖所示X﹣1、X﹣2、X﹣3、X﹣4四種質粒導入大腸桿菌，然后分別涂布在含有青霉素或四環素的兩種培養基上．在這兩種培養基上均不能生長的大腸桿菌細胞類型有 ．
（4）如果X﹣1用E1酶切，產生850對堿基和3550對堿基兩種片段：那么質粒X﹣2（Tcr基因的長度為1200對堿基）用E2酶切后的片段長度為對堿基．

Answer 1

【答案】
（1）特異性地識別和切割DNA
（2）①②③
（3）無質粒細胞和含X﹣3的細胞
（4）4750
【解析】解：（1.）基因工程中使用的限制酶，其特點是特異性地識別和切割DNA．
（2.）因目的基因和質粒都是用E1切開且質粒上有兩個E1酶切位點，故Apr基因和Tcr基因的黏性末端相同，既可能出現Apr基因和X﹣1連接的產物（X﹣1），也可能出現Tcr基因和X﹣1連接的產物（X﹣2），還可能出現X﹣1兩端連接形成的產物（X﹣3）．
（3.）X﹣1含有Apr基因，該基因表達后對青霉素有抗性，X﹣2含有Tcr基因，該基因表達后對四環素有抗性，X﹣3不含抗性基因，X﹣4同時含有Apr和Tcr基因，Apr和Tcr基因表達后，對青霉素、四環素都有抗性．故而在含有青霉素或四環素的兩種培養基上不能生長的大腸桿菌中不含X﹣1、X﹣2、X﹣4，即無質粒細胞和含X﹣3的細胞．
（4.）用E1酶切X﹣1，產生850對堿基的Apr基因大部分堿基片段和3550對堿基含有E2酶切位點的片段．與Tcr基因形成含有4750個堿基對的X﹣2質粒．用E2酶切割質粒，由環狀變為鏈狀，堿基對數不變．
【考點精析】認真審題，首先需要了解基因工程的原理及技術(基因工程的原理是利用DNA重組技術)．