Question

【題目】泡菜與酸奶均采用乳酸菌進(jìn)行發(fā)酵。現(xiàn)有研究人員打算從泡菜中獲取可用于酸奶發(fā)酵的乳酸菌菌種，其操作如下：

（1）使用_________________法將少量泡菜汁接種于培養(yǎng)基上，經(jīng)厭氧培養(yǎng)后得到圖示結(jié)果。

（2）將上述培養(yǎng)基中各菌落轉(zhuǎn)移至MRS-碳酸鈣固體培養(yǎng)基（配置方法為將MRS培養(yǎng)基冷卻至45～50℃時，加入已滅菌的碳酸鈣，充分混勻，倒平板）中，厭氧培養(yǎng)48小時后，發(fā)現(xiàn)有部分菌落的周圍出現(xiàn)透明圈，其原因是________________________________________。

（3）將上述培養(yǎng)基中具有透明圈的菌落，轉(zhuǎn)入MRS液體培養(yǎng)基中發(fā)酵48小時后，進(jìn)行紙層析后顯色處理，得到下圖實(shí)驗(yàn)結(jié)果（A為1．5％乳酸標(biāo)樣，其余為不同菌種發(fā)酵液），則下列菌種屬于乳酸菌的是________________________。

（4）在鮮奶中加入上述菌種進(jìn)行發(fā)酵后會出現(xiàn)固形物凝聚成團(tuán)的現(xiàn)象，推測出現(xiàn)該現(xiàn)象的原因是____________________________________________。

（5）因?yàn)榫�種相同，部分研究人員猜測制作酸奶的過程中可能會產(chǎn)生亞硝酸鹽，進(jìn)而測出酸奶中的亞硝酸鹽含量為1mg／kg。于是他們認(rèn)為制作酸奶的過程中會產(chǎn)生亞硝酸鹽，但是另一些研究人員認(rèn)為這個結(jié)論不可靠，其理由是_____________________________。請給出改進(jìn)實(shí)驗(yàn)的思路，以進(jìn)一步確定此結(jié)論的可靠性：

方案改進(jìn)：______________________________________________________。

預(yù)期結(jié)果和結(jié)論：若___________________________________________，則說明酸奶發(fā)酵過程中會產(chǎn)生亞硝酸鹽。

Answer 1

【答案】稀釋涂布平板 細(xì)菌代謝產(chǎn)生的酸性物質(zhì)分解碳酸鈣，形成透明圈 B、C、D 上述菌種發(fā)酵過程中產(chǎn)生的乳酸，降低了pH，使得其中的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)被破壞而凝聚成團(tuán) 亞硝酸鹽可能來自于原料（鮮奶） 增設(shè)一組實(shí)驗(yàn)，測定鮮奶中的亞硝酸鹽的含量 酸奶中亞硝酸鹽含量高于鮮奶中亞硝酸鹽含量

【解析】

據(jù)題文的描述和圖示分析可知：該題考查學(xué)生對實(shí)驗(yàn)室中微生物的純化培養(yǎng)的方法及其分離等相關(guān)知識的識記和理解能力，以及能對實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理的能力并能對一些簡單的實(shí)驗(yàn)方案做出恰當(dāng)?shù)脑u價和修訂能力。

(1) 根據(jù)培養(yǎng)的效果圖可以判斷：將少量泡菜汁接種于培養(yǎng)基上的接種方法是稀釋涂布平板法。

(2) 在加入CaCO3的MRS培養(yǎng)基中培養(yǎng)從泡菜汁中分離出來的各菌落，由于細(xì)菌代謝產(chǎn)生的酸性物質(zhì)能夠分解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，所以會在菌落周圍形成透明圈。

(3) 將上述周圍有透明圈的菌落轉(zhuǎn)入MRS液體培養(yǎng)基中發(fā)酵48小時后，進(jìn)行紙層析后顯色處理，其結(jié)果如圖所示。已知A為1.5％乳酸標(biāo)樣，B～E為不同菌種發(fā)酵液，其中的B、C、D均出現(xiàn)了與A相同的顯色結(jié)果，說明B、C、D菌種的發(fā)酵產(chǎn)物中均含有乳酸，因此都屬于乳酸菌的菌種。

(4) 在鮮奶中加入上述菌種（乳酸菌）進(jìn)行發(fā)酵后會出現(xiàn)固形物凝聚成團(tuán)的現(xiàn)象，究其原因是：上述菌種在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的乳酸降低了奶液的pH，使得其中的蛋白質(zhì)因空間結(jié)構(gòu)被破壞而凝聚成團(tuán)。

(5) 在酸奶中檢測出含有亞硝酸鹽，該亞硝酸鹽的來源可能是在制作酸奶的過程中產(chǎn)生的，也可能是來自于原料（鮮奶）。由于在制作酸奶之前沒有對鮮奶中是否含有亞硝酸鹽進(jìn)行檢測，所以依據(jù)檢測的結(jié)果得出“制作酸奶的過程中會產(chǎn)生亞硝酸鹽”的結(jié)論是不可靠的。若要確定此結(jié)論的可靠性，需增設(shè)一組實(shí)驗(yàn)，測定鮮奶中的亞硝酸鹽的含量。若測定結(jié)果為酸奶中亞硝酸鹽含量高于鮮奶中亞硝酸鹽含量，則說明酸奶發(fā)酵過程中會產(chǎn)生亞硝酸鹽。