Question

【題目】研究發現，不同濃度的胰島素可以緩解肝細胞的損傷，且胰島素濃度越高保護作用越強。LPS是一種導致肝細胞損傷的常見物質（用生理鹽水配置）�，F提供正常大鼠的肝臟完成實驗步驟。（要求：胰島素濃度配置成低中高三個濃度，用細胞存活數作為指標）

（1）實驗步驟：

①肝細胞懸液的制備：取健康幼年鼠肝臟，適宜條件下剪碎再用________________ 消化，放入卡氏瓶中和________________中進行，________________ 培養。 得到細胞懸液后分成________________ 組，編號A-E備用。

②胰島素溶液：用________________ 配制低中高三種不同濃度的胰島素溶液，分別加入對應的C、D、E培養瓶中。

③A組作為空白對照，其余各組加入________________ 。

④各組存活細胞數的檢測。

（2）用柱形圖預測各組的實驗結果______________ 。

Answer 1

【答案】胰蛋白酶 CO2培養箱 原代 5 生理鹽水 等量的LPS 不同濃度的胰島素緩解肝細胞的損傷示意圖

【解析】

1. 胰蛋白酶能分解蛋白質，胰蛋白酶作用時間過長，則細胞會被消化掉若時間太短，消化不充分。

2. 設計實驗遵循對照原則，該實驗需要一個空白對照，即添加生理鹽水的對照組。

（1）實驗步驟：①肝細胞懸液的制備：取某健康幼年大鼠的肝臟，適宜條件下取出剪碎再用胰蛋白酶消化，經多次洗滌離心處理得到分散的肝細胞；加入適宜的細胞培養液置于卡氏瓶和CO2培養箱中進行原代培養；將培養得到的肝細胞懸液隨機分為5組，編號為A-E，每組均需再設置多個重復樣液，置于相同且適宜的培養瓶中培養備用。
②胰島素溶液：用生理鹽水配制低、中、高三種濃度的胰島素溶液，分別加入到C、D、E組的肝細胞懸液中。

③A組作為空白對照，其余各組加入等量的LPS。

④各組存活細胞數的檢測。

（2）實驗結果預期：若本實驗的結果用細胞存活率作為檢測指標，各組的存活細胞數先用比色計測出OD值，然后計算各組的細胞存活率=該組OD值/A組OD值*100%，不考慮細胞死亡對OD值的影響，由于LPS能導致肝細胞損傷，不同濃度的胰島素可以緩解肝細胞的損傷，等量LPS的情況下，胰島素濃度越大，細胞存活率越高，用柱形圖表示各組的實驗結果如下：
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