Question

【題目】金黃色葡萄球菌是一種具有高度耐鹽性的微生物，可引起人類肺炎、腸炎等疾病。金黃色葡萄球菌在血平板(培養基中添加適量血液)上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色。下圖為定性檢測鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程，請回答相關問題：

(1)按細胞結構分類，金黃色葡萄球菌屬于__________生物，從培養過程分析，金黃色葡萄球菌可進行______呼吸。

(2)7.5% NaCl肉湯培養基為微生物提供的營養成分包括____________________________，用7.5% NaCl肉湯培養基進行選擇培養的主要目的是__________________________________。

(3)操作中在血平板上的接種方法是______________，接種操作前后需要對接種工具進行________滅菌。

(4)在制備血平板時需將pH調節至__________(填“微酸性”或“微堿性”)后滅菌，待培養基__________后，再加入適量血液。按培養基功能分類，血平板屬于______培養基。

(5)經多次規范操作、重復實驗，血平板上均出現________________的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，但鮮牛奶供應商仍認為此菌并非鮮牛奶所攜帶，因此，要對本操作進行完善，完善的方案是_____________________________________________________。

Answer 1

【答案】 原核 有氧 碳源、氮源、水和無機鹽等 增加金黃色葡萄球菌的數量 平板劃線法 灼燒 微堿性 冷卻 鑒別 周圍存在透明圈 設置不加鮮牛奶其他操作均相同的對照組

【解析】試題分析：微生物的營養物質有5類，分別是水、無機鹽、碳源、氮源及生長因子。培養基按功能分為選擇培養基和鑒別培養基：①選擇培養基：培養基中加入某種化學物質，以抑制不需要的不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物生長，培養、分離出特定的微生物（如培養酵母菌和霉菌，可在培養基中加入青霉素；培養金黃色葡萄球菌，可在培養基中加入高濃度的食鹽）；②鑒別培養基：根據微生物的代謝特點，在培養基中加入某種指示劑或化學藥品，鑒別不同種類的微生物，如可用伊紅-美藍培養基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤）。在含有纖維素的培養基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養基中的纖維素形成紅色復合物。當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復合物就無法形成，培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈。

（1）如何判斷細菌：帶“菌”字的生物中，“菌”字前有“桿”“球”“弧”“螺旋”等表示形態的字的都是細菌，如大腸桿菌、肺炎雙球菌、葡萄球菌、霍亂弧菌等都是細菌，葡萄球菌屬于細菌，屬于原核生物；在培養的過程中由于沒有密閉培養，所以葡萄球菌屬于有氧呼吸的菌種。

（2）7.5%NaCl肉湯培養基中含有蛋白質，所以可以提供氮源和碳源，又含有水分和氯化鈉，所以提供的營養物質為碳源、氮源、水和無機鹽；高濃度的鹽溶液可以對微生物進行選擇，而葡萄球菌可以生存在高濃度的鹽溶液中。

（3）題圖中的接種過程使用接種環進行接種，此接種方法是平板劃線法；操作前后對接種環的滅菌方式是灼燒滅菌。

（4）血液是微堿性的，為維持紅細胞的正常形態，在制備血平板時需將pH調節至微堿性后滅菌，為防止高溫破壞血細胞，滅菌后的培養基應在冷卻后，再加入適量血液；由于該培養基能夠鑒別是否含有葡萄球菌，所以屬于鑒別培養基。

（5）由題干“金黃色葡萄球菌在血平板（培養基中添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色”，所以如果經多次規范操作、重復實驗，血平板上均出現透明圈的菌落，說明初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌；要進一步證明金黃色葡萄球菌來自鮮牛奶，需要對本實驗進行完善，即需要設計對照實驗，對照組實驗的設計是在培養基中不加鮮牛奶而其它操作均相同。