Question

【題目】肥胖已經嚴重危害人類健康。3T3-L1前脂肪細胞是小鼠胚胎來源、具有纖維母細胞形態的細胞株，在胰島素（INS)、地塞米松（DEX)和3-異丁基-1-甲基-黃嗓呤（IBMX)的共同刺激下，具有100%分化成成熟脂肪細胞的能力，是目前國際上體外研究肥胖及脂代謝常用的細胞模型。為研究發酵大麥提取物對3T3-L1前脂肪細胞分化的影響，科研人員進行了相關實驗。將一定數目的植物乳桿菌接種到經過處理的粉碎過篩大麥和水的混合液中，制備發酵大麥提取物（LFBE)。除不接種植物乳桿菌外，其余操作方法相同，制備未發酵大麥提取物（RBE)。實驗處理及結果如下。（表格中+表示加入了該物質，-表示未加入）

組別 處理方法	模型組	空白組	對照組（提取物濃度ug/mL）			實驗組（提取物濃度ug/mL）
			100	200	400	100	200	400
3T3-L1前脂肪細胞+培養液	+	+	+	+	+	+	+	+
1 ；	+	-	-	-	-	-	-	-
2 ；	-	-	+	+	+	-	-	-
3 ；	-	-	-	-	-	+	+	+

（1）表格處理方法1、2、3的變量分別是__________、__________、_________。

（2）實驗結果：經RBE處理3TL3-L1前脂肪細胞誘導分化后，與模型組相比，中低濃度的RBE均未顯著減少細胞分化率，400ug/mLRBE處理組細胞分化率為模型組的90%。與模型組細胞相比，經LFBE處理3TL3-L1前脂肪細胞誘導分化后，低、中和高三個濃度的LFBE均能顯著減少細胞分化率。與RBE相比，LFBE明顯抑制3T3-L1前脂肪細胞分化且隨濃度增加，抑制能力加強，其中400ug/mLLFBE組細胞分化率只占模型組的40%，僅比空白組多14%。請用柱狀圖表示出所得實驗結果。

______

（3）要觀察3T3-L1前脂肪細胞分化成成熟脂肪細胞的程度，可用_________染色，典型的成熟脂肪細胞的形態表現為細胞進一步增大，呈圓形，胞內布滿__________色脂滴，密集于核周，形成“指環樣”結構。

（4）多種激素和生長因子在脂肪細胞分化過程中發揮著重要的作用。近些年的研究顯示，這些激素或生長因子在作用于脂肪細胞膜表面的________后，經不同信號通路的信號傳遞，通過直接或間接的修飾調控脂肪細胞分化的轉錄因子活性，進而實現對脂肪細胞分化的調控。

Answer 1

【答案】 INS、DEX、IBMX RBE LFBE 蘇丹Ⅲ 橙黃色 特異性受體

【解析】本題考查實驗設計、脂肪的鑒定，激素作用特點相關知識，意在考察考生對知識點的理解、作圖和應用能力。

（1）實驗中要遵循單一變量的原則，由題意可知3T3-L1前脂肪細胞在胰島素（INS)、地塞米松（DEX)和3-異丁基-1-甲基-黃嗓呤（IBMX)的共同刺激下，具有100%分化成成熟脂肪細胞的能力。而該實驗研究的是發酵大麥提取物對3T3-L1前脂肪細胞分化的影響所以實驗表格中處理方法1應標準模型應是INS、DEX、IBMX三者都有，2組應是對照組即未發酵大麥提取物RBE，3應是實驗組RBE。

（2）根據實驗結果作圖即可，以細胞分化率為縱坐標，以不同濃度的RBEH和LFBE為橫坐標，1組作為標準模型即分化率為100%為標準對照，因為400ug/mLLFBE組細胞分化率只占模型組的40%，通過計算空白對照組應占40%-14%=26%；圖中要表示出400ug/mLLFBE組細胞分化率只占模型組的40%，因為隨著LFBE濃度增加，抑制能力加強，所以低濃度的LFBE細胞分裂率比該濃度的要高即可。

（3）脂肪可以用蘇丹Ⅲ進行染色，會出現橙黃色的現象。

（4）激素和生長因子需要與特異性受體結合后才能發揮作用，所以只有作用于脂肪細胞膜表面的特異性受體后才能發揮調節作用。