Question

【題目】甲型H1N1流感是一種急性呼吸道傳染病，其病原體甲型H1N1流感病毒是一種RNA病毒。針對甲型H1N1流感病毒的預防和治療，科研人員設計了相應地兩種技術路線，分別如圖1、圖2所示。據圖分析回答下列問題：

（1）甲型H1N1流感病毒表面有一種特征性蛋白質A，適合作為疫苗的有效成分。通過基因工程的方法制備含蛋白質A的疫苗的過程如圖1所示。其中過程①代表的是___________，過程③構建A基因重組載體時，應在目的基因（A基因）前后插入___________，從而保證目的基因的準確表達。

（2）甲型H1N1流感病毒表面還有一種特征性蛋白質B，制備抗蛋白B的單克隆抗體過程如圖2所示。該過程中首先需要獲得B淋巴細胞和骨髓瘤細胞，請根據圖示寫出獲得B淋巴細胞的方法：___________。細胞融合時常用的促融劑是______________________。

（3）HAT培養基的作用是經選擇性培養篩選出___________細胞，之后還需要進行___________和抗體檢測，經多次篩選，就可獲得具備___________特點的雜交瘤細胞。

Answer 1

【答案】逆轉錄 啟動子和終止子 向小鼠體內注入蛋白質B，再從產生免疫反應小鼠的脾臟中獲得B淋巴細胞 聚乙二醇（PEG） 雜交瘤 克隆化培養 能無限增殖，又能分泌抗蛋白B抗體

【解析】

單克隆抗體是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術來制備，雜交瘤抗體技術是在細胞融合技術的基礎上，將具有分泌特異性抗體能力的B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為B細胞雜交瘤。

（1）該病毒是RNA病毒，要先逆轉錄成DNA片段才能表達出相應的蛋白質，①代表逆轉錄。有RNA逆轉錄的DNA片段可能沒有啟動子和終止子，所以要在DNA片段前后添加啟動子和終止子。

（2）單克隆抗體制備過程中要在小鼠體內注入相對應的抗原物質B，然后分離B淋巴細胞，與骨髓瘤細胞融合。細胞融合用的化學試劑是聚乙二醇（PEG）。

（3）單克隆抗體制備時要篩選出產生所需抗體的雜交瘤細胞。這種雜交瘤細胞既可以無限增殖又可以產生相應抗體。通過克隆化培養這種細胞就可以獲得大量單一抗體。