Question

【題目】【生物——選修1:生物技術實踐】

“口嚼酒”因日本著名動畫電影導演新海誠的新作《你的名字》而引起人們的關注。世界上有些地方很就有口嚼酒的記載。請回答下列相關問題：

（1）口嚼酒的做法是:首先需要將米煮熟，然后放入口中咀嚼—段時間，直至米粒變為糊狀，再將其吐入特制容器中，令其發酵，經過幾天便成為甜酸味的酒。上述的制作過程中，“咀嚼”可能具有兩個作用，分別是__________和__________。參與口嚼酒形成初期的微生物主要是來自空氣中的__________，末期形成酸味，可能是因為密封不嚴,產生了__________等物質。

（2）口嚼酒是一種自釀酒，不僅品質不高，而且衛生條件難以把握，會有雜菌滋生的危險。某生物興趣小組想探究口嚼酒制作過程中會滋生哪些微生物，進行了進一步的實驗，實驗步驟如下：

①制作口嚼酒。

②制作培養基：計算→稱量→溶化→__________→倒平板。

③接種：每天同一時間將口嚼酒液體搖勻后按照圖1和圖2的方法進行操作，該方法是________。并在每天接種的培養皿上注明培養日期，最后將所有培養基放在相同且適宜的環境下培養。

④經過一段適宜時間后，觀察不同培養基上的菌落數和菌落的形態，并進行品種鑒定。圖3是三個不同時間獲得的培養基，其時間先后為________（填字母）。

上述實驗在時間上形成前后對照，但是還需要設置一個空白對照，目的是________________________。

（3）興趣小組成員在實驗后期看到培養基上長滿了許多雜菌菌落，若他們采用圖4的方法對雜菌中的母的菌進行純化，則在________（填數字）區最可能獲得純凈的母的菌。

Answer 1

【答案】 增大酶與米飯的接觸面積，有利于發酵 使唾液淀粉酶將米飯中的淀粉分解成麥芽糖 酵母菌 醋酸 滅菌（或高壓蒸汽滅菌） 稀釋涂布平板法 B、C、A 檢驗培養基滅菌是否徹底（答案合理即可給分) 5

【解析】試題分析：無菌操作技術有消毒和滅菌，消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化學藥劑消毒法，滅菌有灼燒滅菌法適用于接種工具、干熱滅菌法適用于玻璃器皿和金屬工具、高壓蒸汽滅菌法適用于培養基及容器的滅菌。接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，平板劃線分離法：由接種環以菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線，微生物細胞數量將隨著劃線次數的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經培養后，可在平板表面得到單菌落。稀釋平板計數是根據微生物在固體培養基上所形成的單個菌落，即是由一個單細胞繁殖而成這一培養特征設計的計數方法，即一個菌落代表一個單細胞．計數時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養基內。

（1）將熟的米飯放入嘴里“咀嚼”，一方面增大酶與米飯的接觸面積，有利于發酵，另一方面使唾液淀粉酶將米飯中的淀粉分解成麥芽糖。口嚼酒形成初期，酵母菌通過無氧呼吸產生酒精，末期密封不嚴,醋酸菌進行有氧呼吸產生了醋酸。

（2）微生物培養基的配制過程：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。圖1和圖2顯示的接種方法是稀釋涂布平板法，該方法獲得的菌種隨著時間的推移，會越來越多，所以圖3中的先后順序為B、C、A。上述實驗在時間上形成前后對照，但是還需要設置一個空白對照，以檢驗培養基滅菌是否徹底。

（3）圖4為平板劃線法，該方法隨著劃線次數的增加，細菌的數量越來越少，最后為單一菌了，所以5區最可能獲得純凈的母的菌。