Question

【題目】人凝血因子Ⅷ對缺乏人凝血因子Ⅷ所致的凝血機能障礙具有糾正作用，主要用于防治甲型血友病、獲得性凝血因子Ⅷ缺乏而導致的出血癥狀及這類病人的手術出血治療。下圖是利用山羊乳汁生產人凝血因子Ⅷ的圖解，請據圖回答下列問題。

（1）與基因組文庫相比，從cDNA文庫中獲得的目的基因_____（填“有”或“無”）內含子。①過程利用了_____________原理。

（2）在②過程中，人凝血因子Ⅷ基因應插入質粒的______________之間。基因表達載體中標記基因的作用是___________________。

（3）卵母細胞在體外培養到_______時期才可以進行去核處理。③過程通過______方法使兩細胞融合，構建重組胚胎。

（4）在重組胚胎的培養液中加入________________________等天然成分以提供營養物質。培養液需要定期更換的原因是_______________________________。

Answer 1

【答案】無 DNA（雙鏈）復制 啟動子和終止子 鑒別受體細胞中是否含有目的基因并將含目的基因的 受體細胞篩選出來 減數第二次分裂中期（MII） 電刺激（或振蕩） 血清、血漿 清除代謝產物，防止代謝產物積累對細胞自身造成危害

【解析】

圖示分析，①表示PCR，增加目的基因的數量，②表示構建基因表達載體，③受體細胞與去核的卵母細胞融合形成重組胚胎。

（1）與基因組文庫相比，從cDNA文庫中獲得的目的基因無內含子。①PCR擴增目的基因，利用了DNA（雙鏈）復制原理。

（2）②表示構建基因表達載體，在此過程中，人凝血因子Ⅷ基因應插入質粒的啟動子和終止子之間。基因表達載體中標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因并將含目的基因的 受體細胞篩選出來。

（3）卵母細胞在體外培養到MII時期才可以進行去核處理。③受體細胞與去核的卵母細胞融合形成重組胚胎，此過程通過電刺激（或振蕩）方法使兩細胞融合。

（4）在重組胚胎的培養液中加入血清、血漿等天然成分以提供營養物質。為了清除代謝產物，防止代謝產物積累對細胞自身造成危害，培養液需要定期更換。