Question

（09廣東卷）第38題（生物技術實踐）和39題（現代生物科技專題）是選做題，考生只需作答其中一題。請根據下述材料，回答第38題或39題。

   材料：飼料原料中的磷元素有相當一部分存在于植酸中，豬、禽等動物由于缺乏有關酶，無法有效利用植酸，造成磷源浪費，而且植酸隨糞便排除后易造成環境有機磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸，因此成為目前重要的飼料添加劑之一。

（10分）生物技術實踐

（1）商品化植酸酶主要來自微生物。在產酶菌株篩選過程中，常在基本培養基中添加不溶于水的植酸鈣制成固體平板，植酸鈣被植酸酶分解后可在平板上產生                 ，可根據其大小選擇目的菌株，所得菌株需要進一步測定植酸酶活性。活性測定可以植酸鈉作為底物，活性可用一定條件下單位時間       表示。

（2）利用上述所得菌株制備植酸酶的流程如下圖：

 

 

 

 

 

Ⅰ中的主要成分為       ；Ⅱ中包含多種酸酶等多種蛋白質。請寫出一種純化得到植酸酶的方法及其依據。

（3）為建設基因工程菌，可用PCR等技術從上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反應包含多次循環，每次循環包括三步：       。反應過程中打開模板DNA雙鏈的方法是       。

（4）除植酸酶外，微生物還應用在                  的生產中。

Answer 1

（1）透明圈     植酸鈉的消耗量（肌醇和磷酸的生成量）

（2）小分子雜質   

凝膠色譜法：根據蛋白質之間分子大小，吸附性質等差異進行純化。（或電泳法：根據蛋白質之間電荷，分子大小等差異進行純化。）

（3）變性，復性，和延伸      加熱

（4）蛋白酶，脂肪酶，纖維素酶

解析：本題考查對微生物的分離和培養，蛋白質的純化，酶活性鑒定等知識，結合實際應用。