Question

【題目】[生物——選修3：現代生物科技專題]

根據基因工程的有關知識，回答下列問題：

（１）限制性內切酶切割ＤＮＡ分子后產生的片段，其末端類型有 和 。

（２）質粒運載體用EcoRⅠ切割后產生的片段如下：

為使運載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，還可用另一種限制性內切酶切割，該酶必須具有的特點是 。

（３）按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即 DNA連接酶和 DNA連接酶。

（４）反轉錄作用的模板是 ，產物是 。若要在體外獲得大量反轉錄產物，常采用 技術。

（５）基因工程中除質粒外， 和 也可作為運載體。

（６）若用重組質粒轉化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞，原因是 。

Answer 1

【答案】（1）平末端（1分) 粘性末端 (1分)

（2）切割產生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產生的相同 (2分)

（3）T４ (1分) Ecoli (1分)

（4）mRNA (2分) 單鏈DNA (2分) PCR（聚合酶鏈式反應）(1分)

（5）動植物病毒 (1分) λ噬菌體的衍生物 (1分)

（6）未處理的大腸桿菌吸收質粒（外源DNA）的能力極弱 (2分)

【解析】

試題分析：（1）限制性內切酶在它識別序列的中心軸線處切割DNA分子后產生的是平末端，而在在它識別序列的中心軸線兩側將DNA的兩條鏈分別切割后產生的是黏性末端。

（2）若用不同的限制酶切割運載體與含有目的基因的DNA片段，只有切割后運載體與目的基因產生的黏性末端相同，才能使運載體與目的基因相連。因此質粒運載體用EcoRⅠ切割后，為使運載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，還可用切割產生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產生的相同的另一種限制性內切酶切割。

（3）根據酶的來源不同，DNA連接酶分為兩類: 一類是從T４噬菌體中分離出來的，稱為T４DNA連接酶，另一類是從大腸桿菌中分離得到的，稱為E·coli DNA連接酶。

（4）反轉錄是以mRNA為模板來合成DNA的過程，因此反轉錄作用的模板是mRNA，產物是單鏈DNA。可以在體外短時間內大量擴增DNA的技術叫PCR(多聚酶鏈式反應)技術，所以若要在體外獲得大量反轉錄產物，常采用PCR（聚合酶鏈式反應）技術。

（5）基因工程中的運載體除質粒外,還有動植物病毒、λ噬菌體的衍生物等。

（6）大腸桿菌細胞外有細胞壁和細胞膜,能阻止其他物質的進入,導致未處理的大腸桿菌吸收質粒（外源DNA）的能力極弱 ，所以一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞。