Question

【題目】（一）回答下列與果酒和果醋的制作的有關問題：

（1）葡萄酒是酵母菌在無氧條件下的發酵產物，即將____________氧化成乙醇，當培養液中乙醇的濃度超過____________時，酵母菌就會死亡。果醋則是醋桿菌在有氧條件下將____________氧化而來的。

（2）用葡萄汁制葡萄酒：發酵瓶裝量不能超過____________。開始時，酵母菌的____________會使發酵瓶出現負壓，原因是________________________，若這種負壓情況持續3天以上，必須加入____________，使發酵盡快發生。

（二）某研究小組欲利用抗蟲基因，通過農桿菌轉化法培育抗蟲玫瑰。圖1和圖2分別表示出了抗蟲基因和農桿菌Ti質粒的限制性核酸內切酶識別位點和抗生素抗性基因（pstⅠ、Sma Ⅰ、Alu Ⅰ表示限制性核酸內切酶切割位點；amp為氨芐青霉素抗性基因，tet為四環素抗性基因）請回答：

（1）為獲得大量抗蟲基因，且保證形成重組質粒時，目的基因以唯一方向接入，可選用_________（填限制酶的種類）分別切割目的基因和Ti質粒，再用 DNA連接酶連接，形成重組DNA分子，再與經過________處理的______________（A.有amp和tet B.有amp，無tet C.無amp，有tet D.無amp和tet）農桿菌液混合，使重組DNA進入農桿菌。再利用農桿菌轉入培養的玫瑰細胞，使目的基因導入玫瑰細胞中。

（2）將含有導入了目的基因的玫瑰細胞的試管放在______________上，進行液體懸浮培養獲得胚性細胞，進而培育成抗蟲玫瑰。

（3）這種借助基因工程方法，將外源基因導入受體細胞，再通過這些轉基因細胞進行培養，獲得具有特定性狀的新植株的技術就是______________。

（4）當前多地過度開發旅游造成生態環境的破壞，為減緩生態環境的破壞，可發展__________工程，并在旅游區種植抗蟲玫瑰，可有效降低農藥對環境的污染，并獲得較佳的經濟效益、社會效益和__________。

Answer 1

【答案】 葡萄糖 16% 乙醇 2/3 需氧呼吸（或有氧呼吸） 需氧呼吸消耗O2，產生CO2，但CO2溶解度大于O2，使發酵瓶內氣體量減少形成負壓 酵母 Sma I和PstI CaCl2 D 搖床 植物細胞工程技術 生態旅游 生態效益

【解析】本題考查果酒和果醋的制作、基因工程等生物技術及其應用等知識，要求考生掌握果酒和果醋的制作原理和方法，熟練進行發酵操作；能利用所學知識解讀圖形，選擇合適的限制酶獲取目的基因并切割質粒形成重組DNA分子；掌握基因工程的操作程序及其應用，了解植物細胞工程技術及生態工程。

（一）（1）葡萄酒是酵母菌在無氧條件下的發酵產物，即將葡萄糖氧化成乙醇；當培養液中乙醇的濃度超過16%時，酵母菌就會死亡。果醋則是醋桿菌在有氧條件下將乙醇氧化而來的。

（2）用葡萄汁制葡萄酒時，發酵瓶裝量不能超過2/3。開始時，酵母菌的需氧呼吸（或有氧呼吸）會使發酵瓶出現負壓，原因是需氧呼吸消耗O2，產生CO2，但CO2溶解度大于O2，使發酵瓶內氣體量減少形成負壓；若這種負壓情況持續3天以上，必須加入酵母，使發酵盡快發生。

（二）（1）分析圖一可知，獲取目的基因可用限制酶SmaI和PstI或只使用PstI，切割質粒時必需保證標記基因不能全部被破壞，因此為獲得大量抗蟲基因，且保證形成重組質粒時，目的基因以唯一方向接入，可選用Sma I和PstI分別切割目的基因和Ti質粒，再用 DNA連接酶連接，形成重組DNA分子，此時的重組DNA分子中的標記基因為amp；再與經過CaCl2處理（使其成為感受態細胞）的無amp和tet的農桿菌液混合，使重組DNA進入農桿菌。再利用農桿菌轉入培養的玫瑰細胞，使目的基因導入玫瑰細胞中。

（2）將含有導入了目的基因的玫瑰細胞的試管放在搖床上震蕩，進行液體懸浮培養獲得胚性細胞，進而培育成抗蟲玫瑰。

（3）這種借助基因工程方法，將外源基因導入受體細胞，再通過這些轉基因細胞進行培養，獲得具有特定性狀的新植株的技術就是植物細胞工程技術。

（4）當前多地過度開發旅游造成生態環境的破壞，為減緩生態環境的破壞，可發展生態旅游工程，并在旅游區種植抗蟲玫瑰，可有效降低農藥對環境的污染，并獲得較佳的經濟效益、社會效益和生態效益。